金亚倩　胡琼会　王雪奇

【摘要】在本次实验研究中，在括苍山上符合要求的不同区域进行树叶采集，之后分离出酵母菌，纯化后再用简单法提取酵母菌DNA，PCR扩增26S rDNA D1/D2区，PCR产物经过琼脂糖凝胶电泳检测后进行测序，实验结果初步阐明了括苍山野生环境中叶栖酵母菌资源的种类概况。

【关键词】酵母菌；括苍山；26S rDNA D1/D2；分布

引言：

酵母菌是一种单细胞微生物，属于真菌类，结构简单，可以通过出芽方式发生无性繁殖，也可以形成子囊孢子进行有性繁殖。目前已经发现的超过1000多种。酵母菌喜爱潮湿、含有糖分的各种物体表面生活，例如土壤、果皮表层、植物表面，甚至空气当中也存在。酵母菌具有很多特性，在食品生产中、环境保护、工业及科学研究方面等都普遍应用。

一、本实验采样地点

本实验的采样地点是在浙江省临海市括苍山，位于浙江中部沿海，属亚热带季风气候，温暖湿润、四季分明。考虑到本次实验以发掘寻找新的酵母菌种为目的，故采样地点选择人烟稀少的区域，减少人类活动对酵母菌分布带来的影响，同时尽可能增大横向空间距离，提高新酵母菌发现的可能性。

二、采样方法

本次实验采样采用无菌塑料袋进行无菌采样，样品主要为生长成熟的老树叶，叶子在树上生长时间越久越好，刚刚从树上飘落下来的为最佳。对叶子的种类没有特殊要求，可以在不同地理位置选择同一种类的植物，同一株植物从不同高度采集数片叶子，再隔一段距离进行下一次采集，要保持一定的横向距离。……