兔波氏杆菌病的实验室诊断
2015-10-21邵立岩
现代畜牧科技 2015年11期
关键词:血清
邵立岩
兔波氏杆菌病又称为支气管败血波氏杆菌病,引起兔的一种以慢性鼻炎、支气管肺炎及咽炎为特征的呼吸道传染病。
1病原学诊断
1.1细菌培养
样品采集:病兔,将灭菌棉拭子在无菌生理盐水中浸湿,插入病兔鼻腔内,深约10mm,小心转动,蘸取鼻汁;死亡兔或扑杀致死兔,取鼻腔、气管、肺部病变材料用于细菌分离培养。
细菌分离:将附着在棉拭上的黏液涂抹在麦康凯培养基或DHL培养基上,37℃培养48h。肺部病变材料进行培养时,还可用血液琼脂培养基。
结果判定:在改良麦康凯培养基上,支气管败血波氏杆菌菌落直径约1~2mm,圆整、光滑、隆起、透明,略呈茶红色,较大菌落中心厚,呈茶黄色。在DHL琼脂平皿上形成无色半透明,2mm左右菌落。
1.2病原鉴定
生化试验:不发酵碳水化合物,葡萄糖、荒糖、乳糖、甘露醇、果糖木糖呈碱性反应。M.R.试验、靛基质试验、硫化氢产生阴性,V-P试验、枸橼酸盐利用、尿素酶产生、硝酸盐还原、运动力试验阳性。
动物接种试验:常选用幼兔或豚鼠,鼻内接种4h培养物0.1mL,应在几天内出现鼻炎和肺脓肿的典型症状和病理变化。0.5mL剂量耳静脉接种家兔,应于24~48h内死亡。从死亡兔的病变组织及扑杀的活兔的肺脏中均可分离到本菌。
血清平板凝集反应:在清洁的玻片上加一滴阳性血清(约0.3mL),充分混入一铂圈被检菌,轻轻晃动玻片,室温下放置2min。液滴中出现大凝集块或小的粒状凝集物,液体透明,判为阳性。每次试验应设有阴性血清对照和缓冲生理盐水对照。结果判定:液滴中出现大凝集块或小的颗粒状凝集物,液体透明,判为阳性。……
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