惠慧 林海龙 潘晓芳 贾晓东 徐鹤

【摘   要】 目的  探讨大连地区汉族人内皮型一氧化氮基因G894T多态性与原发性高血压之间的关系。方法  Chelex-100法抽提DNA，测定100名高血压患者及健康对照的基因分型，并测定其性别、年龄、体重、血脂等指标。结果  观察组的GT、TT基因型及T等位基因频率均高于正常对照组，P<0.05。结论  一氧化氮合酶基因G894T多态性可能是大连地区汉族人高血压的一种遗传敏感性指标。

【关键词】 高血压;基因顺应性;一氧化氮合酶

【中图分类号】 R544.1    【文献标识码】 A

高血压病是多基因遗传性疾病，基因和基因、环境和基因的相互影响的复杂性导致各人群间的易感基因不同。内皮型一氧化氮合酶（eNOS）属NOS家族，定位于染色体7q35-36，包含有26个外显子和25个内含子，全长约21-22kb，翻译生成的蛋白质产物为1203个氨基酸。至今为止，发现该基因存在近10个多态性位点，而第7核苷酸894处的G被T等位基因所代替后，以致第298号氨基酸由Glu变为Asp[1]。以往的国内外学者研究发现，该基因G894T多态性和原发性高血压密切相关，并具备种族及地区特异性。本人旨在研究大连地区eNOS基因G894T多态性与原发病高血压之间的关系。

1  资料与方法

1.1  病例选择  高血压和正常对照组各100例，男、女各50例，年龄40～65岁。排除标准：患糖尿病、继发性高血压以及严重临床重要疾病（如心脑血管疾病、肝肾及外周血管疾病等）。

1.2  Chelex-100法抽提DNA

1.3  基因型测定上下游引物分别是：5-TCCCTgAggAgggCATgAggC-3，5-TgAgggTCACACAggTTCCT-3。PCR反应体系：50uL反应体系，加超纯水至50ul，混匀后离心。预变性94℃需4min;而后变性94℃ 需0.5 min，退火55℃需1min，延伸72℃需1min，35个循环;最后72℃延伸时间为5min，扩增产物糖凝胶电泳后再采用EB染色。取PCR产物10uL，限制性内切酶BanII 0.5uL，10xBuffer1.5uL，灭菌去离子双蒸水2.9uL，反应总体积共15uL，混匀离心30s，37℃恒温箱孵育2小时。……