肖晶鑑 岳海英 韦婷婷 周平婷 康 敏 王仁生

食管癌是常见的恶性肿瘤之一，其发病率位于全球恶性肿瘤第八位，致死率为第六位，其发病率近年来逐步上升［1，2］。食管癌治疗的主要手段有手术治疗、放疗和化疗等。由于食管癌起病隐匿，早期症状不典型、临床缺乏有效的早期诊断方法，且食管黏膜下有丰富的毛细淋巴管网，以致70%～80%的食管癌患者确诊时已出现淋巴结及远处转移，因而目前晚期食管癌仍以药物治疗为主，但总体疗效并不理想［3］。因此，探索食管癌发生、发展、转移的分子机制，确立防治靶点，寻求新的干预策略对提高食管癌的疗效具有特殊的重要性和迫切性。本研究拟通过体外实验探讨MicroRNA-129-2 靶向调控SOX4 抑制食管癌细胞增殖与浸润转移的作用及作用机制，同时通过体内实验观察MicroRNA-129-2 对食管癌细胞增殖的影响。具体报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料食管癌细胞株NMC109 购自中科院上海细胞生物学研究所细胞库。雄性裸鼠60 只(SPF级)，体质量18 ～22 g(4 ～5 周)，购自广西医科大学实验动物中心。DMEM 低糖细胞培养基为美国Gibco公司生产;质粒提取试剂盒为天根生化科技(北京)有限公司生产;LipofectamineTM2000 转染试剂盒由Invitrogen 公司提供;嘌呤霉素为sigma 公司生产;SOX4多克隆抗体由cell signaling 公司提供;载体miRNASelectTMpEGP-miR 为美国Cell Biolabs 公司生产;MTT 由美国SIGMA 公司提供。

1.2 方法

1.2.1 细胞的培养和转染 食管癌细胞NMC109 培养于含10%胎牛血清、100 U/mL 青霉素和100 U/mL链霉素的DMEM 低糖培养基中，置于37℃、5% CO2饱和湿度培养箱中培养。miR-129-2 mimics 及miR-129-2 mimics NC 由广州锐博公司合成。细胞转染采用LipofectamineTM2000 试剂盒进行，方法参照试剂盒提供的使用说明。……