泉州市公安局 焦 志

1 材料和方法

1.1 样本

所用样本均来自日常案件检材。

1.2 仪器设备及试剂

（1）主要试剂：Identifiler Plus扩增试剂盒，M48核酸纯化试剂盒。

（2）主要仪器：PE9700型DNA扩增仪，ABI3130XL遗传分析。

1.3 DNA的提取

工具类等具有光滑表面的样本采用棉签两步擦拭法擦取，剪取一半放入八连管中，另一半放入1.5mL离心管中。

手套类样本采用 EZ-tape粘取，剪取一半滤膜放入八连管中，另一半放入1.5mL离心管中，按照M48核酸纯化试剂盒的操作手册进行DNA提取。

1.4 PCR扩增

放入八连管中的检材（其中两步擦拭法的棉签适当在PE9700型DNA扩增仪上56℃进行烘干）按照Identifiler Plus试剂盒的操作手册进行，PCR反应体系总体积以盖过检材为准。经过M48核酸纯化试剂盒提取的DNA样本，PCR反应体系总体积为10μL。

1.5 STR分型检测

PCR扩增产物采用毛细管电泳进行分析，在ABI3130XL遗传分析仪上完成。

2 结果和讨论

从表1可以看出，对于工具类检材，M48提取、直接扩增两种方法的检出率分别为50%、60%，其中有5份检材直接扩增法检出而M48提取未检出。对于固相物体表面擦拭物检材，M48提取、直接扩增两种方法的检出率分别为30%、50%，其中有2份检材直接扩增法检出而M48提取未检出。对于这两类检材，直接扩增法的检出率都要高于M48法。从表2可以看出，直接扩增法提取检出、M48提取未检出的检材样本15个基因座都得到了完整的分型，荧光检测信号均值在100～500RFU之间。对于这两类检材M48的提取需要裂解、结合、洗涤、洗脱这四个步骤，检材裂解完毕后需要吸取上清到一新的离心管中进行结合阶段，换管的过程中必然存在着 DNA模板的损失。……