淫羊藿苷对NB4白血病细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制
2015-09-05高素君张云蔚杜雅哲王瑞芳
宋 飞，高素君，张云蔚，杜雅哲，王 露，王瑞芳，苏 龙
(吉林大学第一医院肿瘤中心，吉林 长春 130021)
淫羊藿苷对NB4白血病细胞株增殖和凋亡的影响及其作用机制
宋飞，高素君，张云蔚，杜雅哲，王露，王瑞芳，苏龙
(吉林大学第一医院肿瘤中心，吉林 长春 130021)
目的：研究淫羊藿苷(ICA)对急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株增殖和凋亡的影响，探讨其作用机制。方法：选取处于对数生长期的 NB4细胞，随机分为空白对照组和不同浓度(4、8、16、32和64 μmol·L-1)ICA组，采用MTT法检测作用不同时间(24、48和72 h)后各组 NB4细胞增殖活性,流式细胞术检测各组细胞24 h时细胞周期进程及48 h时凋亡情况，采用Western blotting法检测各组NB4细胞48 h时凋亡相关蛋白的表达水平。结果：细胞培养不同时间(24、48和72 h)后，各ICA组细胞增殖抑制率高于空白对照组(P<0.05)，随ICA浓度增加和作用时间延长，细胞增殖抑制率升高(P<0.05)。各浓度ICA(4、8、16、32和64 μmol·L-1)组NB4细胞48 h后细胞凋亡率分别为(6.52±4.12)%、(10.07±2.36)%、(15.41±3.64)%、(25.18±1.24)%和(29.41±1.43)%，与空白对照组[(2.39±1.87)%]比较差异均有统计学意义(P< 0.05)。各浓度ICA(8、16、32和64 μmol·L-1)组NB4细胞24 h后 S期NB4细胞百分率降低，G1期细胞百分率升高，与空白对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。Western blotting 检测，与空白对照组比较，各浓度ICA组NB4细胞Bcl-2蛋白表达水平明显降低(P<0.05)，而Bax蛋白表达水平明显升高(P<0.05)。结论：ICA通过抑制Bcl-2蛋白表达水平和上调Bax蛋白表达水平诱导急性早幼粒细胞白血病NB4细胞株凋亡。
淫羊藿苷；白血病；NB4细胞；细胞凋亡
淫羊藿为中国传统的补益中药，其主要成分为黄酮类化合物，淫羊藿苷(Icariin,ICA)就是从淫羊藿中提取的黄酮类单体成分。国内外研究表明：ICA对多种实体瘤细胞具有抑制增殖及诱导凋亡作用。在血液系统肿瘤方面，ICA可抑制急性髓系白血病细胞株HL-60细胞增殖，并诱导其凋亡及分化[1-2]，同时对慢性粒细胞白血病细胞株K562细胞也具有抑制增殖和诱导凋亡作用[3]。急性早幼粒细胞白血病(acute promyelocytic leukemia,APL)NB4细胞株具有t(15;17)(q22;q21)，且PML/RARα融合基因阳性，是体外研究APL的理想模型。有关ICA对APL作用的研究国内外尚无相关报道。本研究探讨ICA对典型APL NB4细胞株的增殖抑制和凋亡诱导作用及机制，旨在为ICA在APL治疗中的应用提供理论依据。