任　毅，甘胜伟,李平华

(重庆医科大学附属第一医院眼科，重庆400016)

Dectin-1和TLR4在烟曲霉菌性角膜炎大鼠角膜组织中的表达及其在角膜炎发病中的作用

任毅，甘胜伟,李平华

(重庆医科大学附属第一医院眼科，重庆400016)

目的：探讨烟曲霉菌感染大鼠角膜后Dectin-1和Toll样受体-4(TLR4)表达及炎症因子的分泌特点，阐明其在大鼠角膜炎发病中的作用。方法：40只SD大鼠随机分为对照组(n=10)和烟曲霉菌性角膜炎组(n=30)，对照组不予任何干预，烟曲霉菌性角膜炎组给予双眼烟曲霉菌感染造模，分别于感染12 h(n=10，12 h组)、24 h(n=10，24 h组)和48 h(n=10，48 h组)后取角膜组织，ELISA法检测IL-1、TNF-α、IL-6、IL-10和NF-κB水平，免疫组织化学法、RT-PCR法及Western blotting法测定角膜组织中Dectin-1和TLR4 mRNA及蛋白表达。结果：大鼠造模均成功，眼角膜裂隙灯检测观察可见对照组眼睛清澈，感染烟曲霉菌后，12 h组眼睛表面有明显的一层薄膜，薄膜与健康的角膜边界清晰；24 h组可见眼部有一层白色的浸润灶形成，且表面粗糙；48 h组角膜白色浸润灶进一步加深，且范围明显扩大，基本覆盖了整个眼球。烟曲霉菌感染后，12 h组、24 h组和48 h组角膜组织中炎症因子IL-1、IL-6、IL-10、TNF-α和NF-κB水平明显高于空白对照组(P<0.05)，其中24 h组和48 h组明显高于12 h组(P<0.05)，48 h组明显高于24 h组(P<0.05)；免疫组织化学检测，大鼠角膜组织中Dectin-1和TLR4表达水平随着感染时间的增加逐渐增加，RT-PCR法和Western blotting法检测，大鼠眼角膜组织烟曲霉菌性角膜炎组(12 h组、24 h组和48 h组)Dectin-1和TLR4蛋白及mRNA表达水平明显高于对照组(P<0.05)，其中24 h组和48 h组明显高于12 h组(P<0.05)，48 h组明显高于24 h组(P<0.05)。结论：Dectin-1和TLR4在受到烟曲霉菌感染后可过量分泌，进而造成大鼠炎性相关因子表达，最终促使角膜炎的发生。

真菌性角膜炎；烟曲霉菌；模式识别受体-1；Toll样受体-4

真菌性角膜炎(fungal keratitis)是困扰医学界的一个难题[1]，该病发病急，治疗难度大，属于严重致盲性眼病的一种。既往的研究[2]表明：真菌性角膜炎不易康复可能与免疫损伤密切相关，Dectin-1和Toll样受体-4(Toll-like receptor,TLR4)是介导免疫反应的2个重要因子，同时也是促炎性因子，Chai 等[3]曾发现Dectin-1和TLR4在眼角膜中有一定的表达；Leal等[4]指出：Dectin-1和TLR4促进角膜炎的发生可能与刺激中性粒细胞表达有关。……