陈　为，张　葵，张宸豪，李　强，李　妍

(1.吉林医药学院检验学院免疫学教研室，吉林 吉林 132013；2.第四军医大学西京医院临床免疫科，陕西 西安 710032)

OX-LDL介导内皮细胞损伤及其对TLR-4和EpCAM表达的影响

陈为1，张葵2，张宸豪1，李强1，李妍1

(1.吉林医药学院检验学院免疫学教研室，吉林 吉林 132013；2.第四军医大学西京医院临床免疫科，陕西 西安 710032)

目的：研究氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)对血管内皮细胞的损伤效应及其对Toll样受体4(TLR-4)和上皮细胞黏附分子(EpCAM)表达的影响。方法：培养人脐静脉内皮细胞ECV-304，实验分为对照组和实验组(25、50、100和200 mg·L-1OX-LDL)，处理后细胞继续培养24 h，台盼蓝拒染法检测细胞活力；流式细胞术检测活性氧(ROS)水平、线粒体膜电位(MMP)、细胞周期与凋亡以及EpCAM和TLR-4表达水平。结果：与对照组比较，25、50、100和200 mg·L-1OX-LDL组ECV-304细胞内ROS水平升高，细胞活力和MMP下降(P<0.05)。与对照组比较，25和50 mg·L-1OX-LDL组S期细胞百分率升高，而G0/G1期细胞略减少，SubG1期细胞(凋亡细胞)随OX-LDL浓度增加而增加。与对照组比较，50 mg·L-1OX-LDL组24 h时ECV-304细胞膜表面TLR-4和EpCAM表达水平均明显升高(P<0.05)。结论：OX-LDL具有提高内皮细胞ROS水平、降低细胞活力和MMP以及诱导细胞凋亡等损伤效应，此过程中ECV-304细胞中TLR-4和EpCAM水平升高。

氧化型低密度脂蛋白；血管内皮细胞；活性氧；上皮细胞黏附分子；Toll样受体-4

血管内皮细胞覆盖于血管内膜表面，不仅在维持血管渗透性和血压调节中起关键作用，还通过分泌细胞因子、肽类激素和调节免疫黏附等机制参与免疫应答与炎症反应[1]。血管内皮细胞损伤在动脉粥样硬化(atherosclerosis，AS)、高血压、糖尿病和脑血管疾病等病理过程中起着重要作用[2]。常见导致血管内皮细胞损伤的因素包括内毒素脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)、某些细菌的外毒素、体液中氧化型低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein，OX-LDL)、同型半胱氨酸、血管紧张素Ⅱ(angiotensin Ⅱ，Ang Ⅱ)、末端晚期糖基化终末产物(advanced glycation end products，AGEs)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factors，TNFs)等[3]。近年来，微炎症(microinflammation)的概念被提出并引起重视。微炎症是指以循环系统中炎性蛋白和炎症性细胞因子轻度升高为特征的低强度、慢性炎症状态[4]。……