张 　晶，赵大力，谢忠伟，刘彦军，李志君，李　岩，龚守良，齐亚莉

(1. 北华大学公共卫生学院流行病学教研室，吉林 吉林 132011；2. 吉林(市)出入境检验检疫局，吉林 吉林132012；3. 吉林省长春市人民医院肿瘤治疗科，吉林 长春 130051； 4.吉林大学公共卫生学院 卫生部放射生物学重点实验室，吉林 长春 130021)

电离辐射对Beclin 1过表达和低表达MCF-7细胞模型细胞自噬和凋亡的影响及其调控机制

张 晶1，赵大力2，谢忠伟2，刘彦军3，李志君1，李岩1，龚守良4，齐亚莉1

(1. 北华大学公共卫生学院流行病学教研室，吉林 吉林 132011；2. 吉林(市)出入境检验检疫局，吉林 吉林132012；3. 吉林省长春市人民医院肿瘤治疗科，吉林 长春 130051； 4.吉林大学公共卫生学院 卫生部放射生物学重点实验室，吉林 长春 130021)

目的：建立Beclin 1过表达和低表达MCF-7细胞模型，检测4 Gy照射后细胞自噬和凋亡的变化，探讨Beclin 1的分子调控作用机制。方法：实验分为MCF-7组、MCF-7+4 Gy组、MCF-7-Beclin1+4 Gy组和MCF-7-Belin1 RNAi+4 Gy组。利用分子生物学方法构建Beclin 1过表达载体pcDNA3.1-Beclin 1，并建立Beclin 1过表达和低表达细胞模型。细胞经4 Gy照射后，采用MDC染色荧光显微镜观察自噬细胞百分比，AnnexinⅤ-FITC和PI染色流式细胞术检测凋亡细胞百分比，Western blotting法检测Beclin 1、P53、Bcl-2和Bax蛋白表达。结果：与MCF-7组比较，MCF-7+4 Gy组、MCF-7-Beclin 1+4 Gy组和MCF-7-Beclin 1 RNAi+4 Gy组自噬和凋亡细胞百分比均明显升高(P<0.05 或P<0.01)，以MCF-7-Beclin 1+4 Gy组升高最明显，且高于MCF-7+4 Gy组 (P<0.05)；各组坏死细胞百分比无明显差异。4 Gy照射后，MCF-7组和MCF-7-Beclin 1组细胞中Beclin 1、P53和Bax蛋白表达水平均升高，Bcl-2蛋白表达水平降低，且以MCF-7-Beclin 1组最为明显。结论：成功建立Beclin 1过表达和低表达MCF-7细胞模型，电离辐射能够诱导其细胞自噬和凋亡，且对Beclin 1过表达细胞作用更明显。Beclin1通过激活P53，进而抑制Bcl-2和激活Bax，从而形成以P53为中心的自噬与凋亡分子调控机制。

自噬；细胞凋亡；电离辐射；Beclin 1；P53

乳腺癌放射治疗是临床上常用的治疗方式。实际上，在放疗诱导乳腺癌细胞凋亡过程中，常会出现肿瘤细胞的辐射耐受现象和肿瘤细胞逃逸凋亡，达不到理想的治疗效果。自噬(autophagy)是另一种程序化细胞死亡方式，是真核细胞蛋白降解的重要途径，受诸如辐射等多种外来因素刺激而发生[1-4]。……