姜红涛 姚秀林

[摘要] 目的 比较实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法与细胞培养法检测流行性感冒病毒的差异。方法 采用实时荧光定量RT-PCR及经典的狗肾传代细胞病毒分离2种方法，同时对流感监测点送检的80份疑似流感标本检测流感病毒。 结果 细胞培养病毒分离的阳性数为26份，实时荧光定量RT-PCR的阳性数为36份，χ2=8.1， P<0.005。 结论 通过该实验，验证了实时荧光定量RT-PCR的确快速敏感，适用于实验室快速诊断。

[关键词] 实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应；细胞培养法；流感病毒

[中图分类号] R4 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2015）03（b）-0192-02

2013年出现的流感病毒H7N9经自然重配，致病迅速，易变异，给人们带来极度恐慌，引起WHO 的高度重视[1]，从而使流感病毒病原学的准确快速诊断显得尤为重要。该实验室在2014年1月采用整群抽样法对抚顺市流感监测哨点医院的80份疑似流感样标本进行了实时荧光定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）法与细胞培养法进行了检测流行性感冒病毒的方法比较，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2014年1月在抚顺市国家级流感监测哨点医院，每周采集内科和儿科门诊就诊的流感样病例（体温≥38℃，同时伴有咳嗽或者咽喉疼痛等症状的急性呼吸道感染者）的咽拭子标本，放人pH 7.4-7.6的DMEM采样液中，当日低温送流感实验室检测，每周采集 20份流感样病例的咽拭子标本。

1.2 主要试剂

①抗A（H1N1）亚型血清，抗A（H3N2）亚型血清，抗A（H3N2）亚型血清，抗A（SWL1）亚型血清，抗B型Yamagata系病毒血清，抗B型Victoria系病毒血清由国家流感中心提供。MDCK细胞，辽宁省疾控中心提供；胰酶、Hank液、胎牛血清﹑牛血清白蛋白组分V， 采购于BI公司。DMEM培养基，采购于GIBCO公司。……