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超声波对红曲霉液体发酵代谢产物的影响研究

2015-08-09路书彦仝莹莹

河南科技 2015年12期
关键词:设置实验

王 璐 路书彦 仝莹莹

(河南省产品质量监督检验院,河南 郑州 450004)

红曲霉可利用多种碳源和氮源,合成多种色素、洛伐他汀等生理活性物质。适当强度的超声波作用于液体培养过程,可提高微生物发酵的速度,缩短反应时间,提高代谢产物的质量和产量。本文针对超声波对红曲霉液体发酵代谢产物的影响进行研究。

1 实验材料

1.1 菌株

红曲霉(紫色红曲,Monascus purpurcus)由长江大学生命科学学院微生物实验室提供。

1.2 培养基

斜面培养基:麦芽糖5%、豆芽汁20%、琼脂2%~3%,0.1MPa灭菌25min;

种子培养基:可溶性淀粉6%、黄豆粉0.5%、KNO30.25%、ZnSO40.05%、MgSO40.05%,0.1Mpa灭菌25min;

液态发酵培养基:蔗糖10%、酵母膏0.3%、KNO30.2%、KH2PO40.1%、MgSO4·7H2O 0.05%、KCl 0.05%、FeSO40.001%,0.1Mpa灭菌25min;

2 实验方法

2.1 菌株的培养

2.1.1 菌液的制备

菌悬液的制备:将斜面培养基上的菌株用40mL无菌水冲洗下来,转入装有玻璃珠的150mL培养瓶中,震荡后用6层无菌纱布过滤,滤液即为菌悬液。

种子液的制备:在250mL锥形瓶中加入72mL种子培养基,灭菌后接入3mL菌悬液,29℃振荡培养36h。

2.1.2 发酵培养

将制备好的菌悬液按6%的接种量接入已灭菌的液体培养基,29℃摇床180rmp培养10d。

2.1.3 代谢产物分离

发酵液用滤纸过滤,收集滤出物烘干至恒重,即得红曲霉菌丝干重;

滤液中取出1.5mL,12000rmp 离心10min,去上清进行色素的测定。

2.2 红曲霉液态发酵实验

所用培养设备为立式双门回旋摇床,设置温度为30℃,转速为141r/min。

将菌悬液接入液体发酵培养基中,在相应时间进行相应超声波处理。并留出24 瓶培养瓶作为对照。从培养第3天开始每天取出处理组和对照组各3瓶,进行代谢产物的提取和测定。

本文基于2008年1月—2016年12月观测数据……

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