马艺荞，惠长敏，王秀峰，王利波，陈莹，王永卓，王健鹂

（吉林省蔬菜花卉科学研究院，长春，130033）

一种新的西瓜果斑病种子带菌检测方法

马艺荞，惠长敏，王秀峰，王利波，陈莹，王永卓，王健鹂

（吉林省蔬菜花卉科学研究院，长春，130033）

通过采用病原菌分离、培养基富集培养与PCR技术建立了一套西瓜果斑病菌检测方法。结果表明，MOPS缓冲液对西瓜种子所带病菌分离效果最佳，且利用WFB1/WFB2引物对富集到的病菌进行PCR检测，都产生了预期360 bp片段；对BFB纯菌液和模拟带菌种子浸提液的最低检测限为1.0×102cfu/mL。利用OD值法结合平板涂布记菌落数方法绘制西瓜细菌性果斑病病原菌浓度梯度标准曲线：Y=3.984 1x+0.088 1，R2=0.9991（Y×108cfu/mL）。该检测方法的建立，为西瓜生产中果斑病防治提供了重要技术支持。

西瓜；细菌性果斑病；种子；检测

瓜类细菌性果斑病(Bacterial Fruit Broth，BFB)是一种由西瓜嗜酸菌西瓜种（Acidovorax citrulli）引起的严重的世界性种传病害[1,2]。经KB培养基分离培养的细菌性果斑病菌的菌落为乳白色、圆形、光滑、金缘、隆起、不透明，菌落直径1～2 μm，在365 nm紫外线照射下，菌落不发亮，即不产生荧光色素，对光观察菌落周围有透明圈[3]。瓜类细菌性果斑病分别被农业部（2006年）和国家质检总局（2007年）列入我国规定的检疫性病害之一[4]。瓜类细菌性果斑病主要为害葫芦科植物，如西瓜、甜瓜、南瓜、黄瓜等，自报道以来已经在山东、内蒙古、甘肃、新疆、海南等省发生，给当地的西瓜种植业造成严重的损失[5，6]。

细菌性果斑病主要通过种子远距离传播[7]，病菌在种子中的存活时间较长，且抗逆能力强，主要存活在种皮下的胚乳表层[8]，因此在生产中使用健康无菌的种子是防止细菌性果斑病发生和传播的关键。……