杨丽丽+王晓娥+李占东

摘 要：高分子荧光微球是一种性能良好的蛋白质载体，因可连接多种生物活性物质而便于多参数分析等，在生物医学领域被广泛使用。本研究将聚苯乙烯微球作为蛋白质载体，建立一种新的检测禽流感病毒的血清学方法。结果表明，微球与单克隆抗体、抗原、多克隆抗体和荧光二抗形成了双夹心的微球复合物，建立了禽流感病毒定量免疫诊断的基础。

关键词：禽流感病毒；荧光微球；检测

中图分类号：S852.64 文献标识码：A DOI 编码：10.3969/j.issn.1006-6500.2015.

禽流感（Avian influenza，AI）是由甲型流感病毒引起的一种人畜共患的传染性疾病综合征。根据致病性的不同，禽流感可分为高致病性、低致病性和非致病性三级，是危害养殖业的最重要的疾病之一[1]。高致病性禽流感（High pathogenic avian influenza，HPAI）被世界动物卫生组织列为动物传染病中的A类疫病[2]，在世界范围内具有重要的防疫性和检疫性。禽流感病毒的实验室诊断方法主要有病毒的分离与鉴定、血清学诊断技术[3-5]、分子生物学诊断技术[6-9]、电镜技术等。新近发展起来的荧光微球因其材料不同而种类很多，由早期的聚苯乙烯微球，到后来出现的多种材料的高分子微球，如聚丙烯酸脂、二氧化硅、聚多糖类、聚丙烯酰胺、聚乙烯基吡啶等类型，其中聚苯乙烯微球目前仍被广泛应用[10-11]。以微球为载体，建立了基于荧光微球的流式细胞术检测方法。荧光微球稳定性好、粒度均一、单分散性好，其球形表面的弧度使抗体结合位点的暴露面与抗原决定簇处于最佳的反应状态，既使发光效率稳定高效又提高了反应的灵敏度，因而在生物医学、食品安全、分析化学以及某些高新技术领域都有着很重要的应用[12-13]。……