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流式细胞仪检测线粒体膜电位方法的研究

2015-08-05张楠曦

哈尔滨商业大学学报(自然科学版) 2015年4期
关键词:实验检测

岳 磊,张 垚,张楠曦

(哈尔滨工业大学生命科学与技术学院,哈尔滨150080)

细胞活动的能量主要来自ATP,而80% 以上的ATP是在线粒体中合成的.线粒体是糖、脂肪和氨基酸最终氧化释放能量的场所,线粒体为一双层膜围成的囊状结构,外膜与内膜间的空腔称为外室,由内膜包围的腔称为内室或线粒体基质.线粒体外膜通透性较大,分子质量在15 ku以下物质可自由通过,因此胞质成分与线粒体外室基本相似.线粒体内膜通透性小,分子质量大于1.5 ku物质不易通过,但内膜存在一些载体蛋白与通道以便运输某些物质.质子泵存在于内膜,它将基质内质子泵入外室,从而形成横跨线粒体内膜的线粒体跨膜电位(mitochondrial membrane potential,用 Δψm表示)[1-3].跨膜电位内室为负,外室为正.事实上,Δψm的变化可以暗示着线粒体蛋白复合体的结构改变、细胞色素C的释放、ATP合成不足等多种线粒体功能相关变化,也可以提示由线粒体通路介导的细胞凋亡、细胞死亡、细胞自噬等细胞机体的产生机理.

流式细胞仪(Flow Cytometer,FCM)是以流式细胞术为核心技术,集光学、电子学、流体力学、细胞化学、生物学、免疫学以及激光和计算机等多门学科和技术于一体的先进科学技术设备[4].它可以对快速直线流动状态中的单列细胞或生物颗粒进行逐个、多参数、快速的定性、定量分析或分选,具有检测速度快、测量参数多、采集数据量大[5]、分析全面、分选纯度高、方法灵活等特点,是现代科学研究中的先进仪器之一.本文采用常见的4种……

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