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黄鳝主要组织相容性复合体Iα 基因的克隆及多态性分析

2015-07-13李伟江翱吴辉

湖南农业大学学报(自然科学版) 2015年4期

李伟,江翱,吴辉

(长江大学生命科学学院,湖北 荆州 434025)

主要组织相容性复合体(MHC)在机体获得性免疫中具有重要作用[1]。MHC I 类和II 类分子分别负责内、外源性抗原的加工和呈递[2]。MHC I 类分子是由α 链和β 链(由β2 微球蛋白编码)组成的异二聚体。经典的MHC Iα 分子包含连接肽、跨膜区、胞质区和胞外区等结构域。MHC 分子不仅在群体内存在着大量等位基因,而且等位基因间也存在较多变异[3]。II 类分子的多态性主要集中于外显子2,而I 类分子的多态性主要集中于外显子2 和外显子3[4]。这些区域包含众多抗原结合位点(PBR)。PBR位点的氨基酸发生变异会极大地影响MHC 识别病原并呈递给T 细胞受体的能力[5]。MHC 分子的多态性和哺乳动物、家禽及鱼类的抗病性密切相关[6–8]。MHC 作为用分子标记辅助育种的重要候选基因倍受重视。近年来有多种经济鱼类的MHC 分子被陆续克隆[9–15],鱼类MHC Iα 基因的多态性研究已较为深入[16–18]。黄鳝MHC IIB 基因具有较丰富的多态性[4],但关于其MHC Iα 基因的研究尚少。

黄鳝是一种重要的淡水养殖鱼类,具有很高的食用和药用价值。克隆和发掘具有重要开发潜力的抗病基因,并应用于分子标记辅助育种对黄鳝的健康养殖具有重要意义。笔者克隆黄鳝MHC Iα 基因的全长cDNA 序列,探究其基因结构,分析该基因的组织表达特异性和病原菌感染对基因表达的影响,探讨黄鳝MHC Iα 基因的多态性,以期探明MHC I 类分子多态性与鱼体抗病力的关系。

1 材料与方法

1.1 试验用鱼及病原菌感染

健康鳝鱼约200 条,每条质量60~70g,均购买于市场。……

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