吕志宇，袁正洲，荣本兵，李作孝

(泸州医学院附属医院 神经内科，四川 泸州 646000)



来氟米特对EAE豚鼠外周血CD28/CTLA-4共刺激分子表达的影响

吕志宇，袁正洲，荣本兵，李作孝Δ

(泸州医学院附属医院 神经内科，四川 泸州 646000)

目的 通过观察来氟米特对实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis，EAE)豚鼠外周血CD28/CTLA-4共刺激分子表达的影响，探讨来氟米特对EAE的防治作用及免疫学机制。方法 将50只成年雌性豚鼠随机分为5组，每组各10只，分别为正常对照组、EAE对照组、低剂量、治疗组、中剂量治疗组和高剂量治疗组。低、中、高剂量治疗组于造模前7 d始按体质量分别予来氟米特10、20、40 mg/(kg·d)灌胃，均1次/天，至实验终止。流式细胞术检测各组外周血CD4+T细胞膜上CD28、CTLA-4共刺激分子表达情况并记录豚鼠发病情况。结果 高、中剂量治疗组较EAE对照组潜伏期延长、进展期缩短、神经功能障碍评分降低，差异有统计学意义(P<0.05)，以高剂量治疗组最明显 (P<0.05)。EAE对照组较正常对照组发病高峰期外周血CD4+T细胞膜上CD28分子表达升高(P<0.05)，而CTLA-4表达下降(P<0.05)；高、中剂量治疗组较EAE对照组CD28分子表达下调(P<0.05)，而CTLA-4表达升高(P<0.05)；各治疗组间CD28分子的表达以高剂量治疗组下调最显著(P<0.05)，CTLA-4分子的表达以高剂量治疗组上调显著(P<0.05)。相关分析显示EAE对照组、各治疗组外周血CD28/CTLA-4比值与神经功能障碍评分均呈正比(r=0.85,P=0.002；r=0.77,P=0.000)。结论 来氟米特可减轻EAE豚鼠神经功能缺损症状，且剂量越高效果越好。其作用机制可能是通过下调外周血CD4+T细胞上CD28分子，上调CTLA-4分子的表达，使EAE豚鼠免疫失衡重新达到平衡，从而减轻炎性反应，调节免疫应答，减轻临床症状。

来氟米特；实验性变态反应性脑脊髓炎；多发性硬化；共刺激分子；CD28；CTLA-4

实验性变态反应性脑脊髓炎(experimental allergic encephalomyelitis，EAE)是由T细胞介导的自身免疫性疾病，是研究人类多发性硬化(multiple sclerosis, MS)疾病的理想动物模型[1]。CD28、CTLA-4是CD4+T细胞表面重要的共刺激分子，在T细胞激活始动阶段发挥关键作用，研究发现EAE及MS发病机制与CD28、CTLA-4异常表达有关[2]。

来氟米特(leflunomide，LEF)及其衍生物是一类新型、高效的免疫调节性药物，已在类风湿性关节炎中广泛使用[3]。本研究通过观察来氟米特对EAE豚鼠的神经功能障碍评分的影响及对EAE豚鼠外周血CD4+T细胞表面CD28、CTLA-4表达的影响，探讨LEF治疗EAE的效果及免疫机制，为寻求MS新药提供实验依据。……