鸡miR-20a靶基因TP53INP1鉴定
2015-07-05王宁段逵宋鹤张潇飞张天目张文建闫晓红王守志李辉
王宁,段逵,宋鹤,张潇飞,张天目,张文建,闫晓红,王守志,李辉
(农业部鸡遗传育种重点实验室,东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨150030)
鸡miR-20a靶基因TP53INP1鉴定
王宁,段逵,宋鹤,张潇飞,张天目,张文建,闫晓红,王守志,李辉
(农业部鸡遗传育种重点实验室,东北农业大学动物科学技术学院,哈尔滨150030)
前期研究发现,过表达miR-17-92基因簇能促进鸡前脂肪细胞增殖,但作用机制尚不清楚。生物信息学分析发现,TP53INP1是miR-17-92基因簇成员miR-17-5p和miR-20a的潜在靶基因,研究采用荧光素酶报告基因技术和基因过表达技术开展该靶基因的验证。结果表明,过表达miR-17-92基因簇能显著抑制TP53INP1的3' UTR报告基因活性;而转染miR-20a抑制剂能显著提高TP53INP1的3'UTR报告基因活性。将miRNA抑制剂分别转染到DF1细胞和鸡前脂肪细胞中,采用real-time RT-PCR方法检测细胞TP53INP1基因表达变化。结果显示,miR-20a抑制剂能促进TP53INP1表达,TP53INP1是miR-20a的一个靶基因。
鸡;miR-17-92基因簇;前脂肪细胞;TP53INP1;基因表达
miRNA是一类非编码小RNA分子,通过与靶mRNA不完全碱基互补配对,导致靶基因mRNA降解或翻译抑制,调控靶基因表达[1]。miRNA是机体发育中必不可少的小RNA分子,目前很多研究证明,miRNA参与动物细胞发育、增殖,分化、凋亡及代谢等过程[2-3]。miRNA基因在染色体上的分布非随机,miRNA基因紧密相邻,排列成簇[4-5]。miR-17-92基因簇是目前受关注miRNA簇之一,该基因簇能编码产生miR-17、miR-18a、miR-19a、miR-20a、miR-19b和miR-92等成员,该簇miRNA成员在多种肿瘤中高表达,过表达会导致疾病和癌症发生[6-7]。
人体miR-17-92基因簇位于13号染色体C13orf25上[8],该miRNA簇在动物发育和疾病发生过程中发挥重要作用,可增加成骨细胞增殖能力[9],调节脂肪形成多个信号通路[10]。……
