单纯高血糖诱发大鼠动脉粥样硬化的实验研究
2015-06-13吴晓牧胡国柱吴梨华张昆南
唐 英,吴晓牧,胡 凡,柴 文,胡国柱,吴梨华,张昆南
糖尿病(DM)患者大血管病变是其死亡的主要原因,其心、脑血管疾病的发病率均显著高于非糖尿病人群[1,2]。但单纯高血糖与动脉粥样硬化的关系及其可能机制仍不十分清楚。本研究以单纯高血糖为特征的2型糖尿病模型大鼠为研究对象,观察高血糖是否能引起颈动脉脂纹、脂质斑块形成,以及其与血糖、血脂、同型半胱氨酸及果糖胺之关系,探讨糖尿病动脉粥样硬化的形成和发展机制。
1 材料与方法
1.1 材料 12周龄SPF级SD雄性大鼠(260g~280g)50只(购自湖南斯莱克景达实验动物中心),40%脂肪的胰岛素抵抗诱导模型食料(上海斯莱克实验动物有限责任公司),大鼠胰岛素(INS)酶联免疫试剂盒(美国 Millipore公司),全自动生化仪(日本HITACHI 7600-120)。
1.2 方法
1.2.1 动物模型制备及分组 SD雄性大鼠适应性喂养1周后按体重随机分为正常对照组(对照组12只)和糖尿病模型组(38只),均高脂饲料喂养,每只大鼠每天定量25g,自由饮水,自然昼夜照明,相对湿度为50% ~70%,室温(22~24)℃。4周后,隔夜空腹12 h,造模组大鼠腹腔注射链脲佐菌素(Streptozocin,STZ)溶液35mg/kg;对照组腹腔注射0.1mol/L柠檬酸钠缓冲液。72h后禁食8h~12h大鼠尾静脉采血测定空腹血糖(FBG),以血糖浓度>16.7mmol/L以上为2型糖尿病大鼠模型造模成功,达到模型标准且未死亡的共30只。30只糖尿病模型大鼠随机分为糖尿病1月组(DM1组),3月组(DM3组)和5月组(DM5组),每组10只大鼠。但实验终点由于糖尿病模型大鼠出现死亡,因此DM1组最后为9只,DM3组为10只,DM5组为8只。
1.2.2 大鼠体重 采用电子盘称每1周称体重1次。
1.2.3 大鼠血液样本采集 0月,1月,3月,5月空腹大鼠乙醚麻醉后内眦静脉取血,室温放置30min后3 000r/min离心15min分离血清,-80℃保存。……
