张 咪, 高 璐, 印伯星, 苏万业,3, 杨振泉,3, 顾瑞霞,3

(1.扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州 225127；2.扬州市康源乳业有限公司,江苏扬州 225009；3.江苏省乳品生物技术与安全控制重点实验室,江苏扬州 225127）

基于αs-酪蛋白特异性的牛乳总蛋白质ELISA定量检测方法的建立

张 咪1, 高 璐1, 印伯星2, 苏万业1,3, 杨振泉1,3, 顾瑞霞1,3

(1.扬州大学食品科学与工程学院,江苏扬州 225127；2.扬州市康源乳业有限公司,江苏扬州 225009；3.江苏省乳品生物技术与安全控制重点实验室,江苏扬州 225127）

本研究旨在建立牛乳中总蛋白质的ELISA定量检测方法,并评价该方法在牛乳掺假辨识中的应用效果。首先用αs-酪蛋白标准品免疫新西兰白兔,制备αs-酪蛋白特异性抗血清,并建立αs-酪蛋白的间接ELISA检测方法,结果显示血清效价为1∶640,αs-酪蛋白检测的线性范围是25～600 ng/ml,R2=0.999 5,回收率是96.6%～105.2%。再应用乳成分分析仪,凯氏定氮法和所建立的ELISA法测定8份来源不同的原料乳中总蛋白和αs-酪蛋白含量,结果显示不同牛乳中总蛋白质含量在0.029 2～0.029 8 g/ml,αs-酪蛋白含量在0.008 4～0.009 2 g/ml,占牛乳总蛋白质的比例恒定,平均为0.3,并用该系数建立牛乳中总蛋白质的定量方法。最后对5份人为兑水稀释、添加尿素、BSA和三聚氰胺的模拟掺杂牛乳样品进行检测,测定结果表明基于αs-酪蛋白的ELISA方法比乳成分分析仪法和凯氏定氮法具有更高的灵敏性和特异性,含氮添加物对测定结果无显著影响(P＞0.05）,更适合于作为原料乳及含乳产品中牛乳蛋白质的定量分析。

牛乳；αs-酪蛋白；ELISA；总蛋白

随着生活水平的提高,人们对牛奶及其制品的需求量也日益增加。……