王华齐侠陈燕殷于磊朱建国

（1上海交通大学农业与生物学院，上海市兽医生物技术重点实验室 上海 200240；2上海市医疗器械检测所 上海 201318；3复旦大学附属华东医院病理科 上海 200240）

原发性胃、肠弥漫性大B细胞淋巴瘤的免疫学分型比较分析研究

王华12齐侠2陈燕3殷于磊3朱建国1

（1上海交通大学农业与生物学院，上海市兽医生物技术重点实验室 上海 200240；2上海市医疗器械检测所 上海 201318；3复旦大学附属华东医院病理科 上海 200240）

目的：比较原发性胃、肠弥漫性大B细胞淋巴瘤（PG－DLBCL，PI－DLBCL）的临床特性、免疫学分型。方法：收集26例PG－DLBCL及19例PI－DLBCL，用Hans、Choi和Tally三种免疫学分型法则进行免疫学分型。结果：临床分期上81.3%（13／16）的PG－DLBCL为I／II期，而PI－DLBCL的I／II期者仅占46.7%（7／15）。PG－DLBCL的临床分期倾向低于PI－DLBCL，尽管差异未达统计学意义（P＝0.066）。三种法则分型结果均显示PG－DLBCL的GCB亚型比率较高，与non－GCB（或ABC）亚型比率接近，而PI－DLBCL则以non－GCB（或ABC）亚型为主，GCB亚型比率较低。尤其是在使用Tally法则进行免疫学分型时，PG－DLBCL的GCB亚型数显著高于PI－DLBCL的GCB亚型数（P＝0.03）。结论：PG－DLBCL具有与PI－DLBCL不同的临床生物学特性，与PI－DLBCL相比，PG－DLBCL的临床分期较低，多为I－II期，GCB亚型比率较高。

弥漫性大B细胞淋巴瘤；临床分期；免疫学分型

弥漫性大B细胞淋巴瘤（diffuse large B－cell lymphoma，DLBCL）是非霍奇金淋巴瘤（NHL）中最常见的类型，占西方国家成人NHL的30%－40%，我国数据显示该比例高达50%－60%。DLBCL可发生于淋巴结内以及淋巴结以外的任何部位，根据其原发部位可分为结内原发性（primary nodal，PN）及结外原发性（primary extranodal，PEN）DLBCL。西方数据认为DLBCL主要发生于结内（约60%）［］，而我们前期研究发现，中国人DLBCL以PEN为主（65%），PN为35%，与韩国人数据接近（58% vs42%）［］。PEN－DLBCL中又以胃肠原发性（primary gastriointestinal，PGI）DLBCL最为常见［3］。

随着研究发现，不同部位DLBCL具有不同临床生物学特性［4，5］。许多研究将PG与PI－DLBCL合并在一起作为PGI－DLBCL进行研究，然而Connor等［6］认为二者具有不同临床生物学特性，不应合并分析。迄今为止，有关PG和PI－DLBCL单独分析的数据并不多，且研究结果多有分歧。对于PG－DLBCL，有研究显示其预后较好（5年OS为68－72%）［］，而有研究显示其预后较差（5年OS为40－44%）［］。免疫表型上有数据显示其生发中心B细胞样（GCB）型比率较高［5］，有的数据显示其GCB与非GCB（non－GCB）亚型比率接近［7］，有的数据显示其GCB亚型比率显著低于non－GCB亚型［8］。有的数据显示其GCB亚型预后好于non－GCB亚型［7］，而有的数据则显示其GCB与non－GCB亚型预后无明显差别［6，7］。有关PI－DLBCL单独分析的数据更是少见，有两组报道PI－DLBCL以GCB亚型多见（71.4%，73%），但这两组病例主要以小肠DLBCL为主［3］。

总之，目前PG、PI－DLBCL的研究层面仍较表浅，且研究结果重复性差，不能相互印证，不论是在免疫表型、基因表型及预后和预后相关标记上都不能得出较明确的结论。为此，我们收集了19例PI－DLBCL及26例PG－DLBCL进行比较性研究，主要分析两者在临床特点、免疫学表型及一些基因改变方面的异同。

1.材料与方法

1.1 病例来源：收集复旦大学附属华东医院2000－2013年诊治的26例PG－DLBCL及19例PI－DLBCL。所有病例参照WHO（2008版）造血与淋巴组织肿瘤分类［8］，结合形态学及免疫表型，结合病史将所有病例明确诊断并分类，尽量剔除其他类型淋巴瘤转化性DLBCL病例。

1.2 临床资料收集：收集的临床资料包括患者年龄、部位和临床分期。原发部位定义参照Lopez－Guillermo等［9］的标准。临床分期均按胃肠道NHL的Lugano分期方式［10］进行分期。以上临床资料依据初次确诊时的临床病史、体格检查、手术和（或）影像学检查和骨髓穿刺等检查资料做出判断。

1.3 免疫组织化学染色及分型：石蜡包埋组织4μm厚切片，采用En－Vision法检测瘤细胞免疫表型。45例样本均进行以下抗体检测：CD10、bcl－6、MUM1、GCET1、FOXP1和LMO2。CD10、bcl－6和MUM1等一抗及二抗均购自Dako公司，GCET1、FOXP1和LMO2等一抗购自Abcam公司。均设阳性和阴性对照。分别使用Hans、Choi及Tally免疫分型法则对DLBCL病例进行分型。具体分型方法参见文献［11］。Hans分型法则将DLBCL分为GCB型和非GCB型，Choi及Tally分型法则将DLBCL分为GCB和ABC型。比较三种法则分型结果时，非GCB型与ABC型相对应。

1.4 统计学分析：采用SPSS 13.0软件进行分析。计数资料采用X2检验或Fisher精确检验比较各组间的差异。P＜0.05示差异有统计学意义。

2.结果

2.1 临床特征：（1）年龄性别：26例PG－DLBCL患者中，男性11例，女性15例，男女比例0.73：1。中位年龄68岁（42－87岁）。19例PIDLBCL患者中，男性9例，女性10例，男女比例0.90：1。中位年龄66岁（27－92岁）。两组间的性别及年龄均无显著差异（表1）。（2）Lugano分期：共16例PG－DLBCL有充分临床资料以进行临床分期。I／II期者13例（81.3%），Ⅲ／Ⅳ期者3例（18.8%）。共15例PI－DLBCL有充分临床资料以进行临床分期。I／II期者7例（46.7%），Ⅲ／Ⅳ期者8例（53.3%）。PG－DLBCL的临床分期倾向低于PI－DLBCL，尽管差异未达统计学意义（P＝0.066），这可能与样本数较少有关（表1）。

2.2 免疫组织化学分型：三种法则分型结果均显示PG－DLBCL的GCB亚型比例较高，与non－GCB（或ABC）亚型比率接近，而PI－DLBCL则以non－GCB（或ABC）亚型为主，GCB亚型比例较低。然而仅在使用Tally法侧进行免疫组织化学分型时，PG－DLBCL的GCB亚型数才会显著高于PI－DLBCL的GCB亚型数（P＝0.03），而在使用Hans法则或Choi法则时，这种差异未达统计学意义，这也可能是与样本数较少有关（表1）。3.讨论

表1 胃、肠原发性弥漫性大B细胞淋巴瘤的临床特点、免疫学分型及基因改变的比较

我们的研究结果显示PG与PI－DLBCL在临床特点、免疫学分型改变方面均有一些差异。

首先在临床表现方面，两组间的性别及年龄均无显著差异，然而在临床分期上PG－DLBCL主要以I／II期（81.3%）为主，而PI－DLBCL的I／II期（46.7%）与Ⅲ／Ⅳ期（53.3%）比例接近，虽然差异未达统计学意义，PG－DLBCL的临床分期倾向于低于PI－DLBCL，提示PG－DLBCL的预后可能优于PI－DLBCL。

基因表达谱（GEP）分析发现按基因表达可将DLBCL分成两大分子亚型：生发中心B细胞（GCB）样亚型和活化B细胞（ABC）样亚型，前者预后显著好于后者，经CHOP（环磷酰胺＋多柔比星＋长春新碱＋泼尼松）方案治疗5年生存率分别为60%和35%。然而GEP检测技术复杂且价格昂贵，不利于临床推广应用，Nebraska医学中心因此以GEP分析结果为依据相继推出Hans、Choi和Tally等免疫组织化学分型法则。随着Hans法则的广泛应用，东亚人DLBCL的GCB亚型明显偏低已得到国内外学者的认同。使用Hans及改进的Choi和Tally法则对本组DLBCL进行免疫学分型，我们发现PG－DLBCL的GCB亚型比例偏高，与non－GCB（或ABC）亚型比率接近，而PI－DLBCL则与结内DLBCL相似，仍以non－GCB（或ABC）亚型为主，GCB亚型比例偏低。

我们的研究初步显示，中国人PG－DLBCL具有与PI－DLBCL不同的临床生物学特性，PG－DLBCL多为I－II期，GCB亚型比率较高，而中国人PI－DLBCL这些方面的特点似乎与中国人结内DLBCL接近。然而由于本研究样本数较小，因此一些差异不能达到统计学意义，因此有必要进行大宗样本研究以进一步证实。

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R733.4

B

1009－6019（2015）07－0055－02

王华，男，山东菏泽，硕士在读，执业兽医师，主要研究方向：实验动物医学护理。