刘晓静 汪学龙

(1.皖西卫生职业学院，安徽 六安 237000； 2.安徽医科大学基础医学院，安徽 合肥 230032)

日本血吸虫P7蛋白基因免疫诊断价值的初步研究*

刘晓静1汪学龙2

(1.皖西卫生职业学院，安徽 六安 237000； 2.安徽医科大学基础医学院，安徽 合肥 230032)

目的 为了寻找血吸虫病新的免疫学诊断候选分子，在大肠杆菌中克隆、表达日本血吸虫(SjP7)蛋白，建立纯化重组抗原间接ELISA方法(rSjP7-ELISA)诊断日本血吸虫病。方法 设计引物，用PCR法扩增出日本血吸虫 P7样蛋白基因编码基因序列，T载体连接，再将其亚克隆入pET28a(+)表达载体中，经酶切、测序证实正确后，用IPTG对该重组菌诱导表达，SDS-PAGE和Western blot验证表达量和免疫活性。结果 PCR法扩增出一条大小约为423 bp大小的SjP7样蛋白的DNA片断，将其克隆亚表达质粒pET28a(+)，测序证实具有完整的ORF。结论 日本血吸虫P7蛋白在血吸虫病免疫诊断上具有较大的应用潜能。

日本血吸虫；SjP7蛋白；克隆；免疫诊断

血吸虫病(schitosomiasis)流行于全世界76个国家和地区。目前估计流行区约6亿人口受威胁，感染人口近2亿[1-3]。日本血吸虫主要分布在中国、日本、菲律宾及印度尼西亚等西太平洋地区的一些国家。在我国仅只有日本血吸虫流行，在我国长江流域和长江以南十三个省、直辖市、自治区曾经流行严重。日本血吸虫病是由于日本血吸虫成虫寄生在人或脊椎动物肠系膜静脉中，所引起的一种人兽共患寄生虫病，其主要的病理特征为虫卵肉芽肿导致的肝纤维化。目前，我国仍有90多个县(市)存在血吸虫病流行，有36万血吸虫病人；……