胡刚 湛汇



·论 著·(胃肠道肿瘤专题)

反义miR-224在结肠癌组织中的表达及其对癌细胞增殖的影响

胡刚 湛汇

目的 探讨微小RNA(miRNA)miR-224在结肠癌组织中的表达，以及对体外癌细胞增殖和凋亡的影响。方法 收集2011年2月至2014年3月行手术治疗的134例结肠癌和癌旁组织标本，利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time PCR)检测标本中miR-224表达情况；对人结肠癌细胞SW480进行miR-224反义寡核苷酸转染并培养，利用克隆形成实验和流式细胞仪检测miR-224反义寡核苷酸对SW480细胞增殖和凋亡的影响，利用Real-time PCR和Western blot法对不同转染组细胞中Bcl-2表达情况进行检测。结果 miR-224在结肠癌组织中相对表达水平显著高于癌旁组织(P<0.05)；反义miR-224组人结肠癌SW480细胞克隆形成率显著低于对照组，而细胞凋亡指数则高于对照组，差异均具有统计学意义(P<0.05)；反义miR-224组细胞Bcl-2相对表达量和蛋白相对表达量均低于对照组(P<0.05)。结论 miR-224在结肠癌组织中呈高表达，减少miR-224表达可抑制结肠癌细胞增殖，并加速细胞凋亡，有可能成为结肠癌早期发现及基因治疗的新靶位。

结肠癌；微小RNA-224；反义寡核苷酸技术；表达；细胞增殖

结肠癌是消化系统常见恶性肿瘤，近年来该病发病率和病死率呈逐年上升趋势，韩雪等[1]研究显示，上海市杨浦区常住居民结肠癌的粗发病率和粗死亡率分别从2002的25.52/10万和15.41/10万，上升到2012年的31.76/10万和26.17/10万。该病早期不具有典型的临床症状，常会导致漏诊或误诊，一旦发现已进展为中晚期，增加了治疗难度，因此，如何从分子或基因水平寻找敏感指标以早期发现和诊断已成为研究重点。微小RNA(miRNA)是广泛存在于细胞内的内源性非编码小分子RNA，在肿瘤发生、进展过程中发挥重要作用，而近年来的研究报道亦指出[2-4]，miR-155、miR-21、miR-17等微小RNA在结肠癌发生及进展中发挥重要作用。有研究显示[5]，miR-224在胃癌、肝癌等恶性肿瘤中过表达，与肿瘤转移及侵袭力密切相关。本研究对结肠癌组织中miR-224表达情况进行分析，并利用反义寡核苷酸技术通过抑制miR-224在结肠癌中的表达，探讨其对细胞增殖及凋亡的影响。……