祝晓莹， 王桂美， 胡 敏， 陆 欢， 邓 晶， 严晓红△

硫化氢活化ERK抵抗内质网应激诱导的心肌细胞凋亡＊

祝晓莹1，2＃， 王桂美1＃， 胡 敏1， 陆 欢1， 邓 晶1， 严晓红1△

1武汉大学基础医学院生理学系，武汉 430071
2河南科技大学医学院病原生物学教研室，洛阳 471003

目的 探讨硫化氢（H2S）对心肌的保护作用是否通过激活细胞外信号调节激酶（ERK）通路来抵抗心肌缺血诱导的内质网应激所致的心肌细胞凋亡。方法 60只雄性SD大鼠随机分为对照组、ISO模型组、NaHS＋ISO组及PD98059阻断组，每组各15只。对照组大鼠注射等体积生理盐水；ISO模型组大鼠第1、2天腹腔注射生理盐水，第3、4天注射完生理盐水30min后背部皮下分别注射10mg／kg和5mg／kg的ISO；NaHS＋ISO组大鼠腹腔注射NaHS 14 μmol／kg，1次／d，连续2d后，改为2次／d，连续2d，并在后2d的第1次注射30min后，于背部皮下分别注射10mg／kg和5mg／kg的ISO，1次／d；PD98059阻断组大鼠在上述NaHS＋ISO组大鼠处理基础上，于注射ISO之前经尾静脉注射MEK／ERK抑制剂PD98059（4mg／kg），1次／d，连续2d。每组最后一次注射ISO并禁食12h后，检测心电图、心功能指标；测定血浆中H2S浓度变化；TTC染色测定心肌梗死面积；TUNEL法检测心肌细胞凋亡指数（AI）；免疫组织化学方法检测心肌中GRP78、CHOP及ERK磷酸化（p-ERK）蛋白的表达。结果 ISO模型组大鼠血浆的H2S含量明显低于对照组（P＜0.01）；14μmol／kg NaHS可以显著改善心肌缺血引起的心功能改变，而PD98059阻断组可以逆转NaHS的心肌保护作用；与ISO模型组相比，NaHS＋ISO组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP的表达明显减少（均P＜0.05），p－ERK表达明显增多（P＜0.01），AI、心肌梗死面积明显减小（均P＜0.05）；与NaHS＋ISO组相比，PD98059阻断组大鼠心肌组织中GRP78、CHOP的表达、AI、梗死面积均显著增加（均P＜0.05），心功能明显降低（P＜0.05），而p-ERK无表达。相关分析显示大鼠心肌细胞CHOP表达、AI与p-ERK的表达呈负相关（P＜0.01）。……