林莉

铁皮石斛与玉竹抗疲劳作用的比较研究

林莉

目的 观察铁皮石斛与玉竹及其配方的抗疲劳作用。方法 将ICR小鼠25只随机分为阴性对照组、单味铁皮石斛组、单味玉竹组、铁皮石斛复方组、玉竹复方组，每组5只，连续给药1周（7天）后进行游泳实验，小鼠休息2天后，灌胃相应药物30min后进行耐缺氧实验，记录数据，对比并分析各组的差异。结果 小鼠体质量增长、游泳时间和耐缺氧时间，呈现复方铁皮石斛组［（8.60±0.69）g、（9.86±0.35）min、（28.66±1.28）min］＞复方玉竹组［（7.46±0.55）g、（9.02±0.45）min、（26.78±1.27）min］＞单味铁皮石斛组［（6.40±1.14）g、（8.78±1.00）min、（24.52±2.32）min］＞单味玉竹组［（5.60±1.20）g、（8.56±0.69）min、（23.38±2.21）min］＞对照组［（4.84±0.98）g、（7.44±0.91）min、（19.92± 2.12）min］，且复方组明显高于其它三组（P＜0.05）。结论 铁皮石斛和玉竹均有显著的抗疲劳作用，单味玉竹的抗疲劳作用略亚于单味铁皮石斛，铁皮石斛复方的抗疲劳效果明显优于玉竹复方。

铁皮石斛；玉竹；白术；抗疲劳

很多滋补类的中药都具有抗疲劳的功效。铁皮石斛滋阴清热、益胃生津，润肺止咳，中医临床应用已有2000多年历史，以“千金草”之誉驰名中外。1992年《中国植物红皮书》中被收载为濒危植物[1]。玉竹同样首载于《神农本草经》，具有养阴润燥，生津止渴的功效，且补五劳七伤之损，也是常用滋补之品。运动耐力的提高是抗疲劳能力增强最有力的宏观表现，游泳时间的长短可以反应动物运动疲劳的程度[2]，综合考虑实验条件、操作难易程度、结果的准确性等各方面因素，本研究选用小鼠耐缺氧实验和游泳实验，观察铁皮石斛与玉竹及其配方的抗疲劳作用。

1 实验材料

1.1 动 物 ICR小鼠，雌雄各半，体质量（20.0±2.0），由浙江省医学科学院实验动物中心提供，许可证号：SCXK（浙）2003－001。

1.2 药 品 取铁皮石斛40g，玉竹40g，铁皮石斛与白术各20g，玉竹与白术各20g，共4份。将以上中药分别加水煎煮3次，过滤后，浓缩为1g/mL的铁皮石斛水提液、玉竹水提液、铁皮石斛与白术复方水提液、玉竹与白术复方水提液。均置4℃冰箱保存备用。

1.3 主要仪器及试剂 烧杯若干、铁架台、石棉网、酒精灯、1mL的灌胃针、恒温水浴箱、温度计、50cm× 20cm×20cm的玻璃缸、负重物、秒表、200mL磨口广口瓶、凡士林、钠石灰、0.9%氯化钠溶液。

2 实验方法

2.1 游泳实验 取ICR小鼠25只，雌雄各半，按体质量随机分成阴性对照组（生理盐水）、单味铁皮石斛组、单味玉竹组、铁皮石斛与白术复方组、玉竹与白术复方组，每组5只，阴性对照组给予同等剂量的生理盐水灌胃给药；另四组每天灌药分别为单味铁皮石斛组0.4mL、单味玉竹组0.4mL、铁皮石斛与白术复方组0.4mL和玉竹与白术复方组0.4mL。连续灌胃给药1周。末次给药30min后，在小鼠尾部束一2g的重物，将小鼠分别放入玻璃缸内游泳，并计时。注意观察，当小鼠沉入水中又拼命挣扎露出鼻子3～4次，并且挣扎难以浮出水面者即为体力耗竭，即刻计时，为小鼠的游泳时间。本实验存在的问题：水不够深的时候小鼠的尾巴会触及水槽底部，并且小鼠在水中可能会只是浮着而不游泳，因此，进行游泳实验的水槽一定要够大，水一定要放得够深，不能让小鼠的尾巴触及玻璃缸的底部，小鼠若是不主动游动，就用玻璃棒拨弄，促使其游泳。

2.2 观察小鼠一般症状和体征 在做小鼠游泳实验过程中，每天不定时观察小鼠精神、饮食、活动、二便等状况。

2.3 耐缺氧实验 取游泳实验后小鼠，令其休息2天以恢复体力。阴性对照组给予同等剂量的生理盐水灌胃给药；另四组各灌胃相应药物0.4mL。灌后30min将小鼠放入盛有15g钠石灰的200mL广口瓶内（每瓶只放1只小鼠），用凡士林涂抹瓶口盖严，使之不漏气，立即计时。以呼吸停止为指标，观察小鼠因缺氧而死亡的时间。本实验中，钠石灰不可直接投入广口瓶中，应用纱布包裹，不能让实验小鼠直接接触，否则小鼠误食钠石灰，将直接影响实验的准确性，抑或小鼠眼睛被钠石灰灼伤导致剧痛、狂躁不安，也影响实验的准确性。

3 实验结果

3.1 实验前后小鼠体质量变化 给药前，各实验组与对照组相比，体质量无显著性差异（P＞0.05）。给药1周后，铁皮石斛复方组和玉竹复方组小鼠体质量与对照组相比显著提高（P＜0.01），单味铁皮石斛组与对照组相比差异有统计学意义（P＜0.05），而单味玉竹组与对照组相比差异无统计学意义。见表1。

表1 各组实验前后小鼠体质量变化（g，±s）

表1 各组实验前后小鼠体质量变化（g，±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与铁皮石斛复方组比较，△P＜0.05

组别对照组单味铁皮石斛组单味玉竹组铁皮石斛复方组玉竹复方组只数55555给药前21.18±0.70 21.58±0.54 20.58±0.87 20.22±0.76 20.78±0.63给药后26.02±0.61 27.98±0.68*△26.18±0.68△28.82±0.55** 28.24±0.65**△增长量4.84±0.98 6.40±1.14* 5.60±1.20 8.60±0.69** 7.46±0.55**

3.2 各组小鼠游泳时间比较 铁皮石斛复方组和玉竹复方组整体较单味铁皮石斛组和单味玉竹组延长，且铁皮石斛复方组和玉竹复方组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01），单味玉竹组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。铁皮石斛复方组的游泳时间优于玉竹复方组和二个单味组（P＜0.05）。见表2。

表2 各组小鼠游泳时间比较（±s）

表2 各组小鼠游泳时间比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.05，**P＜0.01；与铁皮石斛复方组比较，△P＜0.05

组别对照组单味铁皮石斛组单味玉竹组铁皮石斛复方组玉竹复方组只数55555给药剂量（mL/d）0.4 0.4 0.4 0.4 0.4游泳时间（min）7.44±0.91 8.78±1.00△8.56±0.69*△9.86±0.35** 9.02±0.45**△

3.3 各组小鼠耐缺氧时间比较 铁皮石斛复方组和玉竹复方组耐缺氧时间较单味铁皮石斛组和单味玉竹组延长（P＜0.01）；铁皮石斛复方组又优于玉竹复方组（P＜0.01）。铁皮石斛复方组和玉竹复方组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.01），单味铁皮石斛组和玉竹组与对照组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

3.4 小鼠一般症状和体征 给药1周，给药组小鼠明显比阴性对照组小鼠活跃，对饮用水的需求较高，毛色更亮更健康。动作更加敏捷，每次灌胃给药时抓住的难度更大。

4 讨论

铁皮石斛是一种常用珍贵中药，具有益胃生津,滋阴清热的功效，主要成分有多糖、生物碱、多种人体必需的微量元素和氨基酸,另外还有酮类、酯类、酚、醇等。研究表明，多糖类物质具有增强T细胞及巨噬细胞免疫活性、直接促进淋巴细胞有丝分裂的作用，临床上广泛用于慢性萎缩性胃炎及降血糖、抗肿瘤、抗衰老和增强机体免疫力等多种疾病，而这些疾病的产生一定程度上都与体内活性氧的代谢失调有关[3]。铁皮石斛能改善甲亢型小鼠的虚弱症状，能对抗阿托品对兔唾液分泌的抑制作用，从而验证了铁皮石斛的养阴生津功效，其所含酚类化合物均具有抗氧化活性，它们对三价铁硫氰酸盐的抗氧化活性强[4]。玉竹具有养阴润燥，生津止渴的功效，主要含多糖、甾体皂苷（铃兰苦苷、铃兰苷等）、黄酮及其糖苷（槲皮素苷等）、微量元素、氨基酸及其他含氮化合物，其中玉竹多糖是玉竹的主要有效成分，含量一般为6.51%～10.27%[5]，玉竹总氨基酸含量约为11.22%～12.20%，其中含有赖氨酸、苏氨酸、缬氨酸、蛋氨酸、异亮氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸7种人体必需氨基酸，以及精氨酸和组氨酸两种人体半必需氨基酸。从实验数据分析，单味铁皮石斛抗疲劳作用要优于单味玉竹。可能原因为铁皮石斛富含多糖、氨基酸以及多种人体必需的微量元素，多糖能显著提高超氧化物歧化酶（SOD）水平，而氨基酸和微量元素能迅速给机体补充能量，使抗疲劳的效果更快更明显。虽然玉竹也含有丰富的玉竹多糖及氨基酸，但是含量有所差异，导致在抗疲劳的作用上效果略亚于铁皮石斛，其中原因还有待更进一步的研究。已有研究表明，铁皮石斛中的多糖是增强免疫的主要有效成分，能促进机体体液免疫、细胞免疫功能和诱生多种细胞因子。铁皮石斛多糖不仅能影响小鼠白细胞数和淋巴细胞移动抑制因子，而且能提高环磷酰胺模型小鼠非特异性免疫、细胞免疫和体液免疫功能[6]，其作用机制与增强巨噬细胞的吞噬功能和NK细胞活性，调节外周CD4+、CD8+细胞和脾淋巴细胞CD4+/ CD8+，保护T淋巴细胞、刺激T淋巴细胞的增殖与分化，增加模型鼠胸腺或脾脏指数有关[7]。

表3 各组小鼠耐缺氧时间比较（±s）

表3 各组小鼠耐缺氧时间比较（±s）

注：与对照组比较，*P＜0.01，**P＜0.05；与铁皮石斛复方组比较，△P＜0.05

组别对照组单味铁皮石斛组单味玉竹组铁皮石斛复方组玉竹复方组只数55555给药剂量（mL/d）0.4 0.4 0.4 0.4 0.4存活时间（min）19.92±2.12 24.52±2.32*△23.38±2.21*△28.66±1.28** 26.78±1.27**△

白术具有健脾益气、燥湿利水、止汗、安胎的功效，还有延缓衰老、强壮作用，促进细胞免疫功能，有保肝、利胆、抗肿瘤和镇静作用[8]。白术主要含挥发油，油中主要有苍术酮、苍术醇、苍术醚、杜松脑,白术内酯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，双白术内酯、苍术内酯等，并含有果糖、菊糖、白术多糖，多种氨基酸及维生素A类成分等[8]，单味白术能使TH细胞明显增加，提高TH/TS比值，纠正T细胞亚群分布紊乱状态，并能增加T淋巴细胞表面IL－2R的表达，白术可提高免疫抑制动物脾细胞体外培养存活率，能延长淋巴细胞寿命，促进细胞免疫[9]。玉竹与铁皮石斛搭配补气药白术后，可产生协同作用，相对于单味药抗疲劳效果有显著的提升。补气药与滋阴药配伍，相辅相成，相得益彰，达到良好的抗疲劳作用。通过小鼠游泳实验和耐缺氧实验，显示铁皮石斛复方的抗疲劳效果明显要优于玉竹复方，说明铁皮石斛与补气药配伍后可以发挥更大的药效。

［1］王冬梅，杜静，黄林芳，等.石斛抗氧化和滋阴作用的试验研究［J］.安徽农业科学，2013，41（15）：:6655－6657.

［2］田永张，李光明，柳其芳，等.抗疲劳作用实验检验方法［J］.中国食品卫生杂志，1999，11（3）：69－73.

［3］GO’mes－alonso S，Fregapane G，Salvador MD，et al.Changes in phenolic compositionand antioxidant activity of virgin olive oil during frying［J］.J Agric Food Chem，2003，51（3）：667－672.

［4］刘春荣，潘小炎.石斛临床与药理研究近况［J］.广西中医药，2002，25（2）：6－8.

［5］林晓莲，李钟.野生玉竹与栽培玉竹的质量分析比较［J］.广西中医学院学报，2005，8（2）：63－68.

［6］施仁潮，竹剑平，李明焱.铁皮石斛抗肿瘤作用的研究进展［J］.中国药学杂志，2013，48（19）：1641－1644.

［7］Sun JP，Zhang GQ.Empirical study on protective effect of Dendrobium candidum Wall.ex Lindl drop on acute radiation－injuried mice［J］.Suzhou Univ J Med Sci，2008，28（2）：200－202，217.

［8］段启，许冬谨，刘传祥，等.白术的研究进展［J］.中草药，2008，39（5）：74－76.

［9］白明学.白术的现代药理研究和临床新用［J］.中国中医药远程教育，2008，6（6）：609.

（收稿：2014－03－28 修回：2014－09－18）

Comparative Study on the Anti-fatigue Effects Between Dendrobium Candidum and Polygonatum

LIN Li.Chinese Medical Hospital of Yunhe County,Yunhe(323600)Zhejiang,China

Objective To compare the anti－fatigue effects of Dendrobium candidum with that of Polygonatum.Methods Twenty－five ICR mice were randomly divided into negative control group,single herb Dendrobium candidum group,single herb Polygonatum group,Dendrobium candidum compound group,and Polygonatum compound group,with 5 mice in each group.All group were given the corresponding drugs for consecutive 7 days,then underwent the swimming test.After that,all mice rested for 2 days,then were intragastrically given the corresponding drug for 30 min and underwent hypoxia experiment.The differences between 2 groups were analyzed.Results The increase in weight was the biggest and swimming time and hypoxia－tolerant time were the longest in Dendrobium candidum compound group（8.60±0.69g,9.86±0.35min,28.66±1.28min）,followed by those in Polygonatum compound group（7.46±0.55g,9.02±0.45min,26.78±1.7min）,then those in single herb Dendrobium candidum group（6.40±1.14g, 8.87±1.00min,24.52±2.32min）,single herb Polygonatum group（5.60±1.20g,8.56±0.69min,2.38±2.21min）,with the least in Negative control group（4.84±0.98g,7.44±0.91min,19.92±2.12min）.There were significant differences between Dendrobium candidum compound group and single herb group and negative control group and between Dendrobium candidum compound group and Polygonatum compound group（P＜0.05）.Conclusion Both of Polygonatum and Dendrobium candidum have obvious anti－fatigue effect.The effect of single herb Polygonatum is slightly minor than that of single herb Dendrobium candidum.The Anti－fatigue effect of Dendrobium candidum compound evidently surpasses that of Polygonatum Compound.

Dendrobium candidum；Polygonatum；Atractylodesv；Anti－fatigue effects

浙江省云和县中医医院中药房（云和 323600）