赵汝楠，于 卉，石晓静，邱艳艳，钱雅新，殷佩浩

上海中医药大学附属普陀医院普外科，上海 200062

蟾毒灵对TGF-β1诱导的HCT-116细胞上皮间质转化作用的影响

赵汝楠，于 卉，石晓静，邱艳艳，钱雅新，殷佩浩

上海中医药大学附属普陀医院普外科，上海 200062

目的 观察蟾毒灵（Bufalin）对大肠癌HCT-116细胞上皮间质转化作用的影响及其可能的机制。方法使用TGF-β1诱导大肠癌HCT-116细胞发生上皮间质转化（epithelial-mesenchymal transition，EMT），制备EMT模型。实验分为空白对照组、模型组、蟾毒灵组。72 h后，应用光学显微镜、侵袭实验、迁移实验观察蟾毒灵对HCT-116细胞形态学、侵袭与迁移能力的影响，Western blot检测EMT相关蛋白E-cadherin、Vimentin及β-catenin表达，免疫荧光法观察β-catenin蛋白分布。结果 模型组较空白组细胞明显伸长变窄且细胞间连接相对疏松。与模型组相比，蟾毒灵组部分细胞呈不典型鹅卵石样上皮细胞改变，部分细胞拉长变窄，细胞间连接较紧密；72 h穿膜侵袭细胞数较模型组明显减少（110.00±26.46vs.413.33±41.63，P＜0.05），72 h迁移细胞数亦较模型组明显减少（507±38.16 vs.898±49.49，P＜0.05），两者与空白对照组均无差异。Western blot检测显示：模型组较空白对照组上皮标志物E-cadhrin下降，间质标志物Vmentin上升；蟾毒灵组则较模型组E-cadhrin上调，Vimentin下调，β-catenin表达无差异。免疫荧光观察示，模型组β-catenin较空白对照组从细胞膜、胞质移至胞核内，蟾毒灵组β-catenin则较模型组集中于细胞质，胞核表达较少。结论 TGF-β1可诱导结肠癌HCT-116细胞EMT；蟾毒灵可能通过抑制β-catenin核移位、阻止HCT-116细胞EMT发挥抑制HCT-116细胞侵袭、迁移的作用。

大肠癌；蟾毒灵；上皮间质转化；转化生长因子-β1；侵袭；迁移

大肠癌是一种发病率居高不下的常见恶性肿瘤[1]。……