脑脉1 号胶囊对移植骨髓间充质干细胞存活的影响
2015-05-07黄一挚伍小燕郭建文
陈 朝,黄一挚,伍小燕,黎 奔,陶 文,郭建文
0 引 言
干细胞治疗缺血性脑血管病是目前最前沿的研究课题之一,骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)可以直接诱导为神经干细胞,然后再转化为具有各种功能的神经元、神经胶质细胞,替代由于缺血缺氧坏死的神经细胞,促进神经功能的修复[1]。但当脑组织缺血缺氧时,组织内兴奋性氨基酸、氧自由基、黏附分子、炎症因子分泌增多等因素,导致新移植的BMSCs 在缺血组织存活率和分化率较低,致使其治疗效果受到限制[2-3]。因此,寻找一种有效的促进BMSCs 增殖、提高BMSCs 存活率的方法成为当前研究的热点[4-5]。调节脑中血海的中药复方脑脉1 号(NMYH)在临床上已被证实是治疗缺血中风一有效方剂[6],不仅能改善脑组织微循环,还可抑制炎症反应,促进机体形成有利于移植细胞存活的微环境。本研究将BMSCs 移植于大脑中动脉栓塞模型大鼠,同时给予NMYH,探讨其对移植BMSCs 存活的影响。
1 材料与方法
1.1 实验动物 SPF 级SD 大鼠,3 ~4 月龄,60 只,雄性,体重250 ~330 g,由南方医科大学实验动物中心提供,实验动物的合格证号:0051720。所有大鼠置于清洁级动物房内饲养,光照明暗各12 h,温度20 ℃~25 ℃,湿度45%~55%。
1.2 主要试剂与仪器 NMYH 胶囊(由炙天麻、水蛭、黄芪、制南星、半夏、川芎、益母草组成,广州中医药大学第二附属医院制剂室提供,批号090702),氯甲基苯甲酰氨(Chloromethyl-benzamidodialkylcarbocyanine,CM-Dil)(美国Molecular Probes 公司,批号V22888),兔抗大鼠CD34 抗体(北京博奥森生物技术有限公司,批号BS-0646R),SABC 试剂盒、DAB试剂盒(北京中杉金桥生物技术有限公司,批号分别为SP-9001、ZLI-9032),细胞培养箱(美国Thermo Scientific 公司),脑立体定……
