李斌　黄艳　王宇　邵晨

摘要 壶菌病是一种新型的由蛙壶菌感染所引起的两栖动物传染疾病，其快速的传染性和广泛的暴发性导致两栖类物种的大面积灭绝，对全球两栖动物的生存产生了巨大影响。介绍了3种鉴定蛙壶菌的PCR方法：常规PCR、巢式PCR和实时定量PCR，并对这3种方法进行分析与比较。

关键词 壶菌病；蛙壶菌；两栖动物；PCR

中图分类号 S188 文献标识码A 文章编号 0517-6611（2015）11-032-03

蛙壶菌（Batrachochytrium dendrobatidis）是壶菌门（Chytridiomycota）、壶菌纲（ Chytridiomycetes）、壶菌目（Chytridiales）的一个新属（Batrachochytrium），且蛙壶菌是该属的唯一物种[1]。蛙壶菌可在4～25 ℃的温度下生长，最适温度17～25 ℃，它们可以在寄主身上过冬。但蛙壶菌对热较敏感，在25 ℃以上的环境中生长较差，若高于28 ℃，生长就会停止，且在37 ℃加热4 h或47 ℃加热30 min或60 ℃加热5 min 致死率将达到100%[2]。蛙壶菌具有快速的传染性和广泛的暴发性，但同时其传染性和暴发性具有明显的季节性和地域性。壶菌病在冬季暴发率较高，且多发生在高海拔地区和某些热带雨林山区[3]。蛙壶菌主要寄生于无尾两栖类成体皮肤和蝌蚪口器中，通过寄主生活的水体进行传播，患病的蛙和蝌蚪携带的蛙壶菌游动孢子会随表皮角质层脱落而被释放到水中，健康蛙和蝌蚪则会因接触含蛙壶菌游动孢子的水而感染壶菌病[4]。蛙壶菌主要通过影响蛙体皮肤的功能来影响其机体的生理机能，皮肤对两栖动物保持物质转运和电解质平衡具有重要作用，个体感染蛙壶菌后，依赖皮肤的电解质转运被抑制率达50%以上，血浆钠、钾浓度分别减少了20%和50%，严重影响了心肌功能，从而导致心跳骤停而死亡[5]。……