柳洋 朱跃兰 侯秀娟 刘小平

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis，RA)是一种累及全身多关节、以慢性滑膜炎和血管翳形成为主要病理改变的自身免疫性疾病。广泛的新生血管网的形成是维持血管翳生长、关节软骨和骨组织遭受侵蚀和破坏的病理基础。血管新生是由多分子机制参与形成的过程，其中缺氧诱导因子(hypoxiainducible factor，HⅠF)—血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)—血管生成素(angiopoietin，ANG)轴［1］起着重要作用。笔者团队前期研究表明芍甘附子汤可能通过降低胶原诱导性关节炎(CⅠA)大鼠滑膜VEGF 及其受体VEGFR 的表达起到抑制血管新生的作用［2］。本实验拟通过进一步观察CⅠA 大鼠滑膜组织中HⅠF-1α、Ang-1 和Ang-2的表达，探讨它们在滑膜血管新生中的作用机制，为临床治疗RA 提供依据。

1 材料与方法

1.1 实验动物

清洁级健康Wistar 大鼠30 只，雌性，体质量(110 ±10)g，鼠龄6 ～8 周，购于北京维通利华实验动物技术有限公司，许可证号:SCXK(京)2012-0001，适应性饲养1 周。

1.2 实验药物

芍甘附子汤加味(方药组成:黑顺片15 g、白芍15 g、甘草10 g、鸡血藤15 g、青风藤15 g、牛膝15 g)，购自北京同仁堂，由北京中医药大学东方医院中药房煎制;雷公藤多甙片(湖南千金协力药业有限公司，生产批号:Z43020138，10 mg/片)。芍甘附子汤加味和雷公藤多甙片按照成人用量的7 倍来计算大鼠用量。

1.3 试剂和仪器

牛Ⅱ型胶原购自美国Chondrex 公司，批号20022;完全弗氏佐剂购自美国Sigma 公司，批号SLBC5083;HⅠF-1α 抗体购自美国Abcam 公司，批号ab8366;Ang-1、Ang-2 抗体均购自北京博奥森生物技术有限公司，批号bs-0800R、bs-0677R;酶标仪购自美国Thermo 公司，型号MK3;足趾容积测量仪购自济南益延科技发展有限公司，型号YLS-7B;德国ⅠKA 高速分散机，型号T10 basic ULTRA-TURRAX。……