陈 倩，张志亮，唐秋萍

(海南省血液中心临床输血研究室，海南 海口 570311)

212例ABO新生儿溶血病血清学检测结果分析

陈 倩，张志亮，唐秋萍

(海南省血液中心临床输血研究室，海南 海口 570311)

目的 通过对本地区212例ABO新生儿溶血病(ABO-HDN)实验室检测结果及影响因素进行分析，为临床诊断与治疗提供实验室依据。方法对送检的怀疑为ABO-HDN的212例新生儿血液标本进行ABO和Rh血型鉴定以及新生儿溶血3项试验检测。结果212例标本中直接抗人球蛋白试验阳性41例，占19.34%，游离抗体试验阳性31例，占14.62%，抗体释放试验阳性119例，占56.13%。A型血患儿HDN的阳性检出率高于B型患儿，女患儿HDN的阳性检出率高于男患儿，差异均有统计学意义(P＜0.05)。HDN的阳性检出率还与标本送检时间有关，患儿出生后3 d内送检标本的阳性检出率最高。结论血清学检测有助于新生儿溶血病的早期诊断和治疗；标本送检时间以及新生儿的性别和血型可能对临床结果有一定影响。

新生儿溶血病；血清学检测；直接抗人球蛋白试验；游离抗体试验；抗体释放试验

新生儿溶血病(Hemolytic disease of newborn，HDN)是由于母亲的免疫系统受到来自胎儿的外源性红细胞表面抗原刺激所发生的红细胞同种免疫反应，母体所产生的IgG性质抗体通过胎盘进入胎儿血液循环，导致胎儿红细胞发生不同程度的溶血，进而出现新生儿黄疸、贫血、肝脾肿大等症状，严重者可有水肿、核黄疸后遗症，甚至死亡[1]。因此HDN的早期正确检测对明确诊断、指导治疗、降低患儿的病死率和改善预后具有重要意义。其中ABO-HDN的确诊主要通过新生儿溶血3项试验，即直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验和红细胞抗体释放试验。这3项试验可直接确认新生儿患病与否，并为制定治疗方案提供依据。本文就近年来本地区送检的212例新生儿高胆红素血症患儿及部分患儿母亲的血清学检测结果进行总结分析，现报道如下：

1 资料与方法

1.1 一般资料 2012年1月1日至2014年5月31日，我中心及外院送检的怀疑为ABO-HDN的新生儿血液标本212例，其中A型血99例，B型113例，部分患儿同时送检母亲血样，母亲血型均为O型。

1.2 试剂/仪器 单克隆抗-A、抗-B标准血清、反定型用ABO细胞、抗D、抗人球蛋白试剂、筛选细胞为上海血液生物医药有限责任公司产品，KA-2200细胞洗涤离心机购自日本Kubota公司，光学显微镜购自日本Olympus公司。

1.3 方法 对患儿和母亲的血液标本进行ABO和Rh血型鉴定。患儿标本同时进行HDN 3项试验，包括直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验和红细胞抗体释放试验，具体操作参照试剂操作说明书和《全国临床检验操作规程》[2]。

1.4 统计学方法 应用SPSS17.0统计软件进行数据分析，计数资料采用χ2检验，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 不同血型患儿ABO-HDN阳性检出率比较 212例ABO-HDN患儿中A型血患儿99例，HDN的阳性检出率为62.63%(62/99)，B型患儿113例，阳性检出率为48.67%(55/113)，A型患儿HDN的阳性检出率高于B型患儿，两者比较差异有统计学意义(χ2=4.15，P＜0.05)。

2.2 不同血型患儿ABO-HDN阳性检出率比较 212例ABO-HDN患儿中，男患儿111例，阳性检出率为46.85%(52/111)，女患儿101例，阳性检出率为60.40%(61/101)，女患儿HDN的阳性检出率高于男患儿，差异具有统计学意义(χ2=6.31，P＜0.05)。

2.3 不同标本送检时间ABO-HDN阳性检出率比较 随着标本送检时间的不同，其HDN阳性检出率比较差异有统计学意义(χ2=9.75，P＜0.05)。其中出生后3 d内送检标本的阳性检出率高于第3～7天送检者，其差异有统计学意义(χ2=10.76，P＜0.05)，而出生后第3～7天送检标本阳性检出率与出生7 d后送检标本比较，差异无统计学意义(χ2=0.055，P＞0.05)，见表1。

表1 不同标本送检时间ABO-HDN阳性检出率比较(例)

2.4 ABO-HDN患儿溶血3项试验结果分析 直抗试验阳性41例，占19.34%，游离试验阳性31例，占14.62%，释放试验阳性119例，占56.13%；其中直抗试验和释放试验同时阳性者24例，占11.32%；游离试验和释放试验同时阳性者17例，占8.02%，直抗试验、游离试验和释放试验3者同时阳性者13例，占6.13%。

3 讨论

临床上由母婴血型不合引起的HDN虽然也可在MN、Kell、Kidd、Duffy等血型系统发生，但相对较少[3-4]，主要见于ABO和Rh血型系统。ABO-HDN是由于母亲体内免疫性IgG-抗A(B)抗体经胎盘进入胎儿的血液循环，致敏并破坏胎儿红细胞，引发胎儿溶血。因O型母亲血清中有IgG抗-A或抗-B抗体，且这些抗体具有较高效价，所以O型血的母亲易引发HDN[5]。本研究中212例ABO-HDN患儿血型分别为A型与B型，母亲血型均为O型；加之胎儿红细胞上A位点抗原决定簇多于B位点，故ABO-HDN的发生以A型患儿为最多见[6]。本研究212例标本中A型患儿HDN的阳性检出率明显高于B型患儿，差异有统计学意义(P＜0.05)，实验结果与文献报道相符。

目前对ABO-HDN的诊断主要通过直接抗人球蛋白试验、血清游离抗体试验和红细胞抗体释放试验等溶血3项试验。这3项试验的结果在HDN诊断中分别代表着不同的临床意义。直抗试验和释放试验主要检测患儿红细胞是否被来自母体的IgG类血型抗体所致敏，这两项试验分别都可作为HDN的确诊试验，不过由于ABO-HDN红细胞上抗体结合量较少，直抗试验结果常为阴性[7]，而释放试验灵敏度高，特异性强，因此成为判断HDN最重要的指标。游离试验则检测患儿血清中是否存在游离的血型抗体，其结果有助于对病情的预后做出判断。游离试验阳性，表明不仅红细胞上有吸附抗体，血清中还存在着游离抗体，往往提示病情严重。本试验中，212例HDN标本直抗试验阳性率为19.34%，游离试验阳性率为14.62%，释放试验阳性率最高，为56.13%，说明在ABO-HDN的诊断中，释放试验是最敏感且最有价值的诊断标准。

对于HDN的发生是否与性别相关，不同的文献报道结果有所不同。朱梅等[8]认为ABO-HDN的发病与性别之间的差异无统计学意义，赵建萍等[9]研究结果则表明男患儿的HDN阳性率要高于女患儿。在本研究中，则发现女患儿HDN的阳性检出率要高于男患儿(P＜0.05)，考虑可能是由于不同地区新生儿性别分布存在差异所致。

本研究还表明，HDN的阳性检出率与标本送检时间存在着明显的相关性。其中以患儿出生后小于3 d HDN的阳性检出率最高，为66.35%，随后HDN阳性检出率开始明显下降。这是由于早期抽血送检的新生儿血液标本中含有较多游离IgG血型抗体及致敏红细胞，但随着发病时间的延长，游离IgG血型抗体及致敏红细胞的数量逐渐减少，且大部分IgG血型抗体以抗原抗体复合物形式存在，失去反应原性，导致检出率降低[6]。因此，对临床上怀疑为ABO-HDN的患儿应及早抽取血样并及时送检，提高标本的阳性检出率，避免耽误临床治疗时机。本研究中，虽然3～7 d标本的阳性率高于7 d后送检标本，但差异无统计学意义。其是否由于7 d后组样本量小(仅为9例，阳性3例)而差异无统计学意义，还有待在今后的研究中扩大该组样本量进一步观察。

本研究结果表明血型血清学检测可为HDN的诊断提供可靠的实验室依据。因此临床医生应意识到血清学检测的必要性，及时送检可疑标本，从而有效提高标本的阳性检出率，为患儿诊治争取宝贵时间。HDN的防治更重要的在于其预防工作，对有流产、死胎、不育症、输血史及夫妇血型不合的孕妇应加强产前血清学检测，发现异常及时进行妊娠期干预治疗，从而有效预防和减少母婴血型不合HDN的发生率。

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[9]赵建萍,杨 慧,黄金伟.78例ABO新生儿溶血病筛查结果分析[J].中国优生与遗传杂志,2010,18(3):103-104.

Analysis of serologic detection results in 212 cases of hemolytic disease of newborn.

CHEN Qian,ZHANG Zhi-liang,TANG Qiu-ping.
Department of Clinical Transfusion,Hainan Provincial Blood Center,Haikou 570311, Hainan,CHINA

ObjectiveTo investigate the serologic detection results and the influence factors of 212 cases of ABO-hemolytic disease of newborn(HDN)diagnosed in our area,and to provide the evidences for clinical diagnosis and therapy.MethodsThe samples of 212 suspected cases of ABO-HDN were analyzed by routine typing and three tests of ABO hemolysis.ResultsOf the 212 samples,direct antiglobulin test showed positive results in 41 cases (19.34%),serum free antibody test was positive in 31 cases(14.62%),and RBC antibody release test was positive in 119 cases(56.13%).The positive detection rate of HDN in newborns was significantly higher in A blood type compared with B blood type(P＜0.05).Comparison between gender revealed higher positivity in females than males(P＜0.05).The newborns within 3 days after birth were found to be at the highest risk of HDN.ConclusionSerologic detection can be useful in the early diagnosis and treatment of HDN.Sample delivery time,gender and blood type of the newborns may influence the clinical outcome.

Hemolytic disease of newborn;Serologic detection;Direct antiglobulin test;Free antibody test; Antibody release test

R722.18

A

1003—6350（2015）13—1932—03

10.3969/j.issn.1003-6350.2015.13.0696

2014-09-28)

陈 倩。E-mail：cqzy4682@163.com