高效液相色谱搭载可变波长检测器测定桃果肉中糖组分
2015-04-13蔡志翔马瑞娟张斌斌沈志军郭绍雷俞明亮
江苏农业学报 2015年4期
关键词:检测
严 娟, 蔡志翔, 马瑞娟, 张斌斌, 沈志军, 郭绍雷, 俞明亮
( 江苏省农业科学院园艺研究所/江苏省高效园艺作物遗传改良重点实验室,江苏 南京210014)
果品中含多种糖分,结构复杂且多为异构体,结构差异性小,采用常规方法对其分离鉴定比较困难。加之单糖既无强的紫外吸收,又无荧光基团,而且在通常情况下为电中性,植物组织中糖检测广泛应用的高效液相色谱法( HPLC) 通常需要进行衍生反应,使之具有强紫外吸收、荧光特性或其他一些可测定的物理化学性质,再使用选择性检测器如紫外检测器、荧光检测器等进行检测[1-5],但这样处理步骤复杂,可能会导致不稳定基团的分解,造成测定结果的偏差[6]。目前常采用液相色谱搭载通用型检测器,如示差折光检测器( HPLC-RID) 测定蔬菜果品中糖组分[7-10],样品不需衍生化处理,可以直接测得糖分,但相对于紫外检测器而言,示差折光检测器( RID) 灵敏度不高,且易受外界环境干扰,对温度变化非常敏感,难以平衡,流动相的波动、洗脱液比的变化等都会明显影响折射率。
可变波长检测器( VWD) 是紫外检测器的一种,几乎所有的HPLC 都配有这种检测器。VWD 选择性高,对温度、流动相的波动和组成的变化不甚敏感。液相色谱搭载可变波长检测器( HPLC-VWD)具有良好的光学性能,广泛用于对大多数有紫外吸收的化合物的检测[11-14]。然而本领域技术人员普遍认为HPLC-VWD 不适用于糖类物质的检测,这是因为糖类特别是葡萄糖等物质吸光度极其微弱,需要选用很低的波长区间进行检测,而常用测定糖类的色谱条件选择的流动相的截止波长都较高,会产生背景吸收。……
登录APP查看全文
