重组七鳃鳗PHB2蛋白的原核表达及纯化
2015-04-11李铁松李庆伟
李铁松, 王 颖, 高 杨, 李庆伟
(辽宁师范大学 生命科学学院, 辽宁大连 116081)
七鳃鳗(Lampetra japonica)属无颌脊椎动物, 是现存脊椎动物中最古老、最原始的物种之一。其化石记录可以追溯到志留纪及泥盆纪, 有现存的“活化石”之称, 被认为是进化和发育生物学研究的新的模式生物, 是研究有颌脊椎动物起源和进化十分难得的实验材料。
Prohibitin(PHB)是一种高度保守的蛋白, 广泛分布于细菌、植物、酵母、原虫、果蝇及哺乳类等多种生物细胞中[1]。目前已知人的 PHB家族包括PHB1和 PHB2, 其结构的保守性和功能的多样性决定了其参与细胞的多种生物学进程。研究表明, PHB在细胞核内起负调节细胞周期的作用[2-5], 抑制细胞周期转换和DNA合成[2,6], 从而抑制细胞增殖。同时,PHB蛋白也可以调控细胞凋亡, 且这种凋亡作用具有双向性, 一方面能够阻止细胞的过度增殖, 另一方面又能抵抗细胞凋亡的产生[7-11]。 PHB正是通过调节细胞增殖、凋亡与分化和调控激素及其受体活性而发挥着抗肿瘤作用。
近年来, 陆续又有研究发现 PHB2与由氧化应激因子(活性氧自由基, reactive oxygen species, ROS)作用引起的生物进程如衰老、Ⅱ型糖尿病、神经退行性疾病及心肌疾病等的改变密切相关[12]。PHB2在呼吸链复合物亚单位的装配中充当分子伴侣, 参与能量代谢, 起到抗衰老的作用[13]。糖尿病病人体内ROS含量和氧化应激水平均显著增高, 引发线粒体结构功能紊乱, 而 PHB可起到稳定线粒体结构功能的作用。PHB2也存在在人类淋巴细胞的线粒体内膜上, 不仅仅在保证电子转运酶的稳定和维持线粒体结构完整性方面起作用, 也参与细胞的信号转导通路, 同时也可作为细胞内 T细胞活化的重要生物标记[12]。……
