元江鲤与建鲤血清转铁蛋白电泳分析
2015-04-10莫云富
贵州畜牧兽医 2015年2期
莫云富
(贵州省黔南州水产工作站,贵州 都匀 558000)
转铁蛋白(Transferrin,简称Tf)能够在机体内可逆而紧密地结合三价铁离子,并参与铁的运输和蛋白质转换,能够广泛参与机体内的生物化学反应并直接关系到氧的利用和代谢[1]。本文采用聚丙烯酰胺垂直凝胶电泳法(PAGE)对元江鲤和建鲤血清转铁蛋白进行了初步探究,通过分析和比较2种鲤鱼种内和种间血清转铁蛋白电泳表型,了解这2种鲤鱼种内和种间生化遗传组成和种质纯度,为2种鲤鱼的人工选育、种质鉴定和种质标准制定提供参考资料,对于进一步研究不同杂交组合获得的子代的生产性状具有一定的意义。
1 材料与方法
1.1 试验用鱼来源及处理 元江鲤来源于云南省元江县元江鲤原种场,平均体重0.3 kg,体长12 cm;建鲤来源于中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,平均体重1.2 kg,体长25 cm。2种鱼均为雄鱼,年龄为2龄。从活鱼的尾柄部侧线处取血1 mL左右,4℃下4 000 r/min离心20 min,取上清液分装于试管中,-20℃下保存备用。
1.2 主要仪器和药品 电泳仪(DYY—4型稳压稳流电泳仪)、电泳槽(DYCZ—22A型电泳槽)、丙烯酰胺单体贮液、分离胶缓冲液贮液、浓缩胶缓冲液贮液、电极缓冲液、0.005 mol/L Tris-Hcl、0.4% 伊凡诺、0.1%考马斯亮蓝、5%固定液,药品均为分析纯。1.3 样品制备 将血清纯化后电泳,电泳结束后用0.1%考马斯亮蓝溶液进行染色,最后用脱色液脱色直至底板颜色褪尽谱带清晰。
1.4 凝胶及缓冲液配制 分离胶和浓缩胶系统分别按表 1[2,3]、表 2[2~5]中的配方严格进行配制。

表1 分离胶系统配方

表2 浓缩胶系统配方……p>
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