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如何选择猪瘟疫苗

2015-04-04步帆,张凤强,秦立鑫

兽医导刊 2015年13期
关键词:猪瘟抗原母猪

猪瘟又名“烂肠瘟”是一种古老的疾病,病原体为猪瘟病毒,世界各地均有流行,具有传染性强、发病率高、死亡率高的特点,世界动物卫生组织将该病列为A类传染病、在我国也被列为一类传染病来预防和控制。发生猪瘟疫情的养殖场猪只之间连续传播的几率非常大,育肥猪、妊娠母猪、仔猪均会发病,急性感染者1周左右死亡、慢性感染者形成僵猪而影响生产性能。目前治疗猪瘟没有有效的方法,只有把预防做在前面才能有效控制该疾病。国家对于猪瘟疫苗的接种也有要求,散养户每年春秋季接种、规模化养殖场按照既定程序接种,最终达到预防该病的目的。在猪瘟免疫过程当中免疫失败情况时有发生,疫苗品种选择、疫苗使用方法、免疫程序设计、母源抗体影响、免疫抑制类疾病的干扰等均会造成免疫失败。

猪瘟疫苗的研究也是经过了漫长曲折的过程,我国在1954年成功研制出了猪瘟兔化弱毒苗,成为世界上最优秀的生物制品之一,该疫苗毒株来源于石家庄地区、接种大耳白兔传代几年后发展为稳定的弱毒株,该疫苗对于控制猪瘟流行、保证养猪业持续发展发挥了巨大作用。虽然大部分养殖场都会接种猪灭活苗由中国农业科学院哈尔滨兽医研究所研制,适用于疫情稳定的猪场(特别是种猪场),其主动免疫保护率为96%,被动免疫率为85.1%,免疫途径是后海穴注射,免疫后14天产生保护力。

5.猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻二联活疫苗。佟有恩等研制的TGE-PED二联弱毒苗适合用于猪场的紧急预防接种,其主动免疫和被动免疫的保护力均能达到95%以上,注射7天后即产生免疫保护力。

6.猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪轮状病毒(G5型)三联活疫苗。目前由哈兽研研制的的猪传染性胃肠炎、猪流行性腹泻、猪轮状病毒(G5型)三联活疫苗(弱毒华毒株+弱毒CV777株+NX株)已经上市,活疫苗能同时诱导机体产生体液免疫与细胞免疫应答,可以用于紧急预防接种。

7.转基因植物疫苗。Kang等通过农杆菌介导蛋白转入法将PEDV S基因中的一段蛋白基因(称为COE基因)与合成的中和抗原表位基因一同导入烟草的基因中表达,表达得到的蛋白在转基因烟草总可溶性植物蛋白中分别为0.1%和2.1%。该研究为以后的PEDV口服转基因植物疫苗的研制奠定了基础。

8.重组乳酸杆菌疫苗。葛俊伟等人先后成功构建了表达PEDV N基因和中和抗原表位基因的重组干酪乳杆菌,并免疫小鼠。研究结果显示重组菌既能诱导局部黏膜免疫应答,也能刺激机体引起特异性免疫应答。胡桂学等将导入了含PEDV纤突蛋白COE基因的重组乳酸杆菌口服免疫断奶仔猪,结果显示仔猪血清中的IgA和IgG含量明显上升。以上研究为新型疫苗的研制提供了参考。

综上所述,开发针对PEDV的快速、准确且便于操作的实验室诊断技术对于PEDV的诊断与研究均具有重要意义;目前我国PED的防制措施主要依靠灭活疫苗和弱毒疫苗的应用,猪流行性腹泻具有发病急、发病日龄小以及死亡率高的特点,猪肠道的局部免疫反应系统在对PEDV的免疫应答中发挥重要的作用,所以能有效刺激机体黏膜和全身免疫应答的新型疫苗将是PEDV疫苗研发的一大趋势。瘟疫苗,但该病始终没有被消灭和净化、免疫失败导致疾病暴发的现象也是层出不穷,文章分析猪瘟疫苗使用现状、发现猪瘟疾病频发原因。

早期猪瘟疫苗称为“猪瘟兔化弱毒脾淋苗”,即将兔化猪瘟弱毒株接种于兔子之后,收获猪瘟病毒含量较高的淋巴组织和脾脏通过减毒操作后制备成疫苗。该疫苗的安全性和保护性比较好,抗体产生快、持续时间长,经过后来改良技术采用真空冻干包装后也易于保存。但此类疫苗制备过程中也存在很大一些工艺方面的问题,比如作为繁殖病毒的大白兔个体差异的问题、再如大白兔淋巴和脾脏产量低、1只家兔只可制备300头份疫苗、疫苗制造成本较高,也有些企业为降低成本而在组织疫苗制备过程中添加细胞抗原、这种情况在兽药监察所抽查过程当中也有发现。后期将此类疫苗做了升级改善,将猪瘟兔化弱毒株接种在幼兔身上,之后取肌肉及实质器官作为原料制备疫苗,此类疫苗称为猪瘟兔化弱毒组织苗,此类疫苗便于制备、免疫效果和保护性较好。

1975年开始各个机构逐渐开始研制细胞苗,此类疫苗在欧洲和日本也有应用。将猪瘟病毒接种在牛睾丸原代细胞培养、之后收取病毒制备的疫苗称为猪瘟牛睾丸原代细胞苗。此类疫苗制备成本低、1只幼兔可制备1 500头份疫苗、可批量生产、适宜于规模化生产。但由于不同的睾丸原代细胞来自不同的供体、会存在批间差异的情况,另外由于引入了外来的细胞、一旦感染其他病毒会引起免疫抑制而造成接种失败,如病毒性腹泻病毒与猪瘟病毒存在竞争关系、会抑制猪瘟病毒在细胞中的生长而造成抗原含量不足。有些猪场接种此类猪瘟疫苗后仍然暴发猪瘟流行可能与此有关,兽药监察所抽查此类疫苗发现有20%左右的产品存在其他病毒污染的问题。

目前国际应用比较多的技术为应用ST细胞传代培养病毒后制备的猪瘟传代细胞苗。此类疫苗采用适宜猪瘟病毒繁殖的ST细胞作为基质,批间差异小、稳定性好、病毒含量高、易于规模化和标准化生产。此类疫苗效价高、是猪瘟牛睾丸原代细胞苗的数十倍,免疫保护性好、数倍稀释也具有很好的免疫效果,持续时间长、一次免疫后效果可持续1年左右。

多联疫苗可达到一次接种预防多种疾病的目的,猪瘟猪丹毒猪肺疫三联苗就是这种类型的疫苗。把猪瘟兔化弱毒株接种细胞后收获的细胞培养病毒液与猪丹毒杆菌弱毒菌液、猪源多杀性巴氏杆菌弱毒菌液混合,加稳定剂制成三联疫苗。该疫苗一般不用于首免,可用于60日龄后的肥育猪的加强免疫。

近些年基因工程亚单位疫苗、DNA疫苗、病毒活载体疫苗、标记疫苗等新型疫苗也逐渐研制成功和应用。

国际上对于猪瘟疫苗有严格的质量要求,RID(兔体感染量或兔体反应量)是衡量猪瘟疫苗好坏的重要标准。按照国际标准,猪瘟疫苗的RID要达到400才具有很好的保护性。在我国商品化疫苗每头份猪瘟细胞苗抗原含量国家标准已经升为750 RID、高于国际标准,脾淋苗抗原含量国家标准为150 RID、低于国际标准。

接种疫苗后要做抗体水平检查以评估免疫接种效果,不同疫苗种类免疫抗体水平会有差异。有研究表明猪瘟脾淋苗免疫抗体合格率最高、其次是猪瘟兔化弱毒苗、猪瘟细胞苗最低。猪瘟脾淋苗免疫效果比较好、免疫抗体合格率最高;猪瘟兔化弱毒疫苗,是国际公认最理想的猪瘟疫苗,只要不是假冒伪劣产品,三类猪瘟弱毒疫苗都可以放心使用。但猪瘟脾淋苗成本较高,主要应用于猪瘟的加强免疫、猪瘟的紧急免疫接种以及控制慢性猪瘟、非典型猪瘟、温和型猪瘟。

不同阶段猪注射疫苗后的保护性也有区别,繁殖母猪、后备母猪免疫抗体合格率最高达,育肥猪达次之,哺乳仔猪和断奶仔猪达最低。种公猪、繁殖母猪、后备母猪至少经过3次以上的加强免疫,所以做好加强免疫,是提高免疫效果的关键。母源抗体会影响哺乳仔猪和断奶仔猪的免疫效果,应该20~30 d第一次注射、60 d再注射一次。

也有试验表明,疫苗抗原含量的高低直接影响到疫苗的使用效果。无论是基础免疫还是二次免疫,不同抗原含量的疫苗免疫效果存在差别。疫苗抗原含量高,免疫效果较理想,抗原含量低的疫苗,首次免疫效果不理想,不能突破母源抗体的干扰。疫苗抗原含量高的疫苗能突破母源抗体的干扰,免疫效果优于低效价的疫苗。猪瘟原代细胞苗由于其生产工艺的不稳定性,疫苗效力标准检测方法落后,造成批间存在一定差异。

对于规模化猪场免疫程序可考虑母猪断奶时注射猪瘟脾淋疫苗或集中统一免疫,注意配种后15 d内、产前15 d内的母猪不注射,15 d后加以补注。公猪一年免疫二次,后备种猪使用前注射猪瘟脾淋疫苗1~2头份。

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