尚发军++++++艾文兵++++++熊志云++++++冯定坤++++++彭智

[摘要] 目的 检测整合素αvβ3拮抗剂SB-273005对C6神经胶质瘤细胞talin、survivin蛋白表达量及其磷酸化的影响。方法将C6细胞常规培养后，分对照组（0 mg/L）、SB-273005低浓度组（25 mg/L）和SB-273005高浓度组（50 mg/L）3组，采用western法检测不同浓度的SB-273005对C6细胞踝蛋白（talin）、生存素蛋白（survivin）表达量以及其磷酸化的变化，并检测各组蛋白条带光密度变化。 结果 不同浓度的SB-273005均能明显降低C6细胞talin、survivin蛋白的表达，对二者的磷酸化有明显的抑制作用。测得对照组、SB-273005低浓度组和SB-273005高浓度组蛋白条带光密度，得出talin/β-actin比值分别为0.76、0.43、0.26（*P<0.05）；磷酸化的talin/β-actin比值分别为0.82、0.33、0.15（*P<0.05）。survivin/β-actin比值分别为0.84、0.21、0.09.（*P<0.05），磷酸化的survivin/β-actin比值分别为0.19、0.04、0.01（*P<0.05）。3组相比，差异有统计学意义。结论 SB-273005对大鼠C6神经胶质瘤细胞talin、survivin蛋白表达量及其磷酸化起负性调节作用。

[关键词] C6神经胶质瘤细胞；踝蛋白；生存素； SB-273005

[中图分类号] R3 [文献标识码] A [文章编号] 1674-0742（2014）12（a）-0044-02

目前研究发现，在胶质瘤细胞中，talin、survivin所能发挥的生物学作用与整合素αvβ3的活性状态密切相关[1]。talin与survivin蛋白的磷酸化水平与胶质瘤恶性程度存在关联性，胶质瘤的恶性程度越高，二者的磷酸化水平随之增高[2]。因此，该实验2013年12月—2014年6月间通过采用整合素αvβ3拮抗剂SB-273005，抑制整合素活性，观察整合素αvβ3的活性改变后与talin、survivin的表达量及其磷酸化是否存在相关性，并探讨其作用机制，以期为脑胶质瘤的治疗寻求更有效的方法，报道如下。

1 材料与方法

1.1 材料

实验自2013年12月开始，2014年6月结束。C6神经胶质瘤细胞由南方医科大学神经外科实验室提供；整合素αvβ3拮抗剂SB-273005为Dupont公司产品；抗talin抗体、survivin抗体、survivin磷酸化单克隆抗体购于武汉博士德生物公司； DMEM培养基、FBS、RIPA缓冲液、TBST液、HRP-羊抗兔LgG、Rabbit Anti-β-Actin等试剂由广州赛哲生物科技有限公司提供。

1.2 方法

1.2.1 细胞样品制备 大鼠C6细胞常规培养，待其进入……