李焰 刘凤丽 王培培 左慧敏 程冉冉 周燕 李芬

脑缺血性疾病是严重危害人类健康的常见病和多发病。脑缺血损伤所涉及的病理生理机制十分复杂，研究发现，在脑缺血后的几个小时内，缺血半暗带或梗死区周围的神经元死亡主要以凋亡性死亡为主。姜黄素具有抗氧化、抗炎、调节神经递质和受体等作用［1，2］。同时姜黄素在缺血性损伤中的作用越来越得到大家的认可，在前期工作中，我们进行了线粒体凋亡通路中Bcl2及Bax相关因子表达变化影响的研究［3］，目前此领域内鲜有对外源性凋亡通路相关因子进行实验研究的报道，本研究采用小鼠局灶性脑缺血再灌注损伤模型，观察姜黄素对缺血再灌注损伤小鼠的caspase-8蛋白表达以及学习记忆功能的影响，从凋亡信号转导通路方面深入探讨姜黄素对小鼠局灶缺血再灌注损伤神经细胞的保护作用的可能分子机制，为临床神经细胞保护新药的开发提供理论研究基础。

1 材料与方法

1.1 实验动物及分组 131只健康雄性昆明小鼠，动物合格证号 SCXK(京)(2007-0001)，清洁级(SPF)，体重28～32 g，由河北工程大学医学院实验动物中心提供。术前在22～25℃实验室中饲养12 d以适应实验室环境。动物随机分为A组:假手术组20只;B组:缺血再灌组［I/R+0.9%氯化钠溶液(NS)］57只;C组:姜黄素治疗组54只;治疗组于脑缺血前1 h腹腔给予20 mg/kg姜黄素。

1.2 主要试剂 姜黄素购自美国sigma公司，用二甲基亚砜溶解配置10 mg/ml储存液，避光于4℃冰箱保存;Caspase-8兔抗鼠多克隆抗体(Santa cruz biotechnology，Inc)。水迷宫(北京硕林苑科技有限公司);图像采集及图像分析系统(Bio-Rad公司)。……