柳芳芸

（宁夏石嘴山市第五人民医院病理科 宁夏 石嘴山 753000）

甲状腺乳头状癌是内分泌系统常见的恶性肿瘤，占甲状腺癌的60%－70%。但在临床工作中常遇到不典型病例，尤其是近年来穿刺技术的发展，往往收到的标本较小，而且滤泡亚型的乳头状癌不含有乳头状结构，单靠HE染色容易误诊。由于PTC 是一种低度恶性的肿瘤，经过合理有效的治疗预后良好。因此探索它的免疫表型对PTC 的诊断与鉴别诊断具有比较重要的意义。我们联合检测CD56、TPO、CKl9、Galectin－3、AAT 的表达情况，旨在探讨这组标志物在甲状腺乳头状病变中的诊断与鉴别诊断的意义。因此，寻找有特异性诊断价值的指标对于区分甲状腺良恶性病变非常重要。而单一的抗体往往不特异，抗体组合诊断甲状腺乳头状癌有很大的临床意义。

1 资料与方法

1.1 标本：收集本院2011 年1 月至2015 年4月手术切除的PTC标本存档蜡块38 例（微小乳头状癌10例，经典型乳头状癌28例），男10例，女28 例，年龄16－72岁，中位年龄44岁。

1.2 检测方法。试剂：CK19（克隆号：A53－B／A2.26）、AAT（多克隆）、Galectin－3（克隆号：9C4）、TPO（克隆号：AC25）和CD56（克隆号：56CO4）均为即用型，S－P 试剂盒及DAB 显色液均购自福州迈新生物技术有限公司。全部组织经10% 中性缓冲福尔马林固定，石蜡包埋，≤4μm 厚度切片，采用免疫组化EnVision法检测，具体操作步骤均按照试剂盒说明书进行。

1.3 结果判定：CK19、AAT 和TPO 染色均以细胞浆出现的棕黄色颗粒为阳性标准，Galectin－3 染色以细胞质或细胞核出现的棕黄色颗粒为阳性标准，CD56 染色以细胞膜出现棕黄色颗粒为阳性标准。按照阳性细胞所占百分数并参考着色强度确定（图1），阳性细胞数＜10% 为（－）＞10%为（＋）。

2 结果

2.1 形态学特征：典型的甲状腺乳头状癌以其分枝状的乳头结构和特征性的毛玻璃样细胞核形态，有核沟，核内假包涵体，核增大是最为突出的表现，卵圆形，长的和相互重叠的核，核轮廓不规则；核膜高度不规则，凹凸不平，伴切迹及不同大小和方向的内陷；另外40%－50%的乳头状癌中有砂粒体，但是往往有一些不典型形态表现的病例则需免疫组化染色鉴别诊断。

2.2 免疫标志的表达：在甲状腺乳头状癌中，5种抗体表达阳性率如下（表1）：CKl9：94.7%（36／38）；Galectin－3：97.3%（37／38）；AAT：100%（38／38）；CD56：10.5%（4／38）；TPO：7.8%（3／38）。5 种 标 志 物单独用于PTC的诊断时，CK19及Galectin－3的灵敏度和特异度最高，AAT阳性表达较弱，但均有＞10%的细胞质阳性表达。CK19，Galectin－3及AAT 同时阳性与CD56，TPO 同时阴性，是诊断PTC 的可靠组合。

表1 CKl9、Galectin－3、AAT，TPO 及CD56在甲状腺乳头状癌的表达

图1 CKl9、Galectin－3、AAT 及CD56在甲状腺乳头状癌中的表达EnVision 10×10

3 讨论

CK19（鼠抗人细胞角蛋白）在甲状腺良恶性增生性病变中的诊断和鉴别诊断作用已有不少报道，Lsic－Dencic等在研究中发现CK19 在大部分PTC 病例中呈阳性表达其强阳性表达预示着肿瘤的浸润潜能；因此CK19 在甲状腺乳头状癌的诊断中具有较高的灵敏度。Galectin－3（鼠抗人Galectin－3）是一同型细胞粘附凝集素，在PTC 中的表达率最高，目前普遍认为Galectin－3是鉴别甲状腺良恶性病变比较可靠的一线免疫组化标记物。CD56及TPO（鼠抗人甲状腺过氧化物酶）在正常、炎性病变和良性肿瘤中的滤泡上皮均可见弥漫表达，目前很多文献也报道其越来越多的应用于PTC的鉴别诊断中。本研究中CD56、TPO 在PTC是阴性标志物。AAT（兔抗人抗胰蛋白酶）是一种糖蛋白，在甲状腺乳头状癌中阳性表达，而正常甲状腺组织AAT 阴性表达。

总之，本研究数据进一步证实了CKl9、Galectin－3、AAT、CD56，TPO 联合免疫组化染色对于PTC做出准确的诊断是十分重要的，对于那些非典型性病变这5种标志物的联合应用有助于PTC的明确诊断。

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