“O”型口蹄疫正向间接血凝试验的操作体会
2015-03-23刘俊青山西省长治市郊区畜牧兽医局046000
当代畜禽养殖业 2015年2期
刘俊青 山西省长治市郊区畜牧兽医局 046000
正向间接血凝试验是目前我国各地动物防疫监督机构对口蹄疫进行免疫抗体水平检测广泛采用的试验方法。该方法具有操作简易、快捷、特异、既可定性又可定量等优点,所需试验设备简单,具备一般条件的实验室即能完成实验操作。但是实验结果受操作技术影响很大,保证实验操作的细节是获取正确结果的关键所在。
1 原理
抗原与其对应的抗体相遇时,在一定条件下会形成抗原抗体复合物,但这种复合物的分子团很小,肉眼看不见。若将抗原吸附在(致敏)经过特殊处理的红细胞表面,只需少量抗原就能大大提高抗原和抗体的反应灵敏性。这种经过口蹄疫纯化抗原致敏的红细胞与口蹄疫抗体相遇,红细胞便出现清晰可见的凝集现象。在间接血凝试验中,红细胞具有抗原载体和指示剂的双重作用。
2 实验器材
本实验所使用的实验器材包括微量血凝板、微量振荡器和8 道移液器。为了保证实验的顺利进行,要选择质量有保障、稳定性好的器材。
(1)微量血凝板。96 孔110°V 型医用血凝板,此板可以叠放,但每次用完需要清洗。清洗方法:用过的血凝板应及时用高压清水冲净,再用5%的盐酸浸泡48 小时,最后用蒸馏水或去离子水冲洗2次,甩干板子倒置于37℃温箱中烘干备用。用前要先检查血凝板孔底是否干净,如发现有透光性差一点的孔,可用酒精棉签擦净。
(2)微量振荡器。使用振荡器振荡时间不宜超过1 分钟,振荡强度不能太大,多块板叠加后振荡时要用手压住最上一板,以防上下的振动造成孔中液体溅出而影响实验结果的准确性。……
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