基于ITS与factor 1-alpha序列桉树焦枯病菌的双重PCR快速检测
2015-03-23麻文建朱天辉
张 静,麻文建,朱天辉
(四川农业大学林学院,成都 611130)
桉树具有生长周期短、易存活、适生范围广、轮伐期短、用途多样化等优点,在我国秦岭淮河以南地区被大规模的引种和栽培,尤其以四川、云南、广东、广西、福建、湖南、贵州为主要栽培区[1]。国内外目前对桉树病害的报道较多,主要以桉树花斑病(Aureobasidiumsp.)[2]、炭疽病(Colletotrichumgloeosporioides)[3]、紫斑病(Septoriamortarlensis)[4]、灰霉病(Botrytiscinerea)[5]和桉树焦枯病[6]等叶部真菌性病害发生较为普遍,其中由丽赤壳属(Calonectriade Not)真菌引起的桉树焦枯病危害最为严重,分布最广泛[5]。桉树焦枯病作为一种世界性病害,已成为威胁桉树的首要病害。桉树焦枯病主要发生在桉树苗木和4年生以下幼树上。受焦枯病病原菌侵染后,轻者出现桉树植株叶片脱落,苗圃与幼林落叶、枯梢、枝条萎蔫等症状;重者则会出现感病苗木叶片全部脱落、顶枯、植株枝条全部枯死等现象[7]。在我国引起桉树焦枯病的丽赤壳属真菌主要为C.quinqueseptata和C.morganii,而C.morganii主要分布在我国西南地区。鉴于该病害的严重性及分布的局部性,原林业部于1996年1月5日把桉树焦枯病列入国内森林植物检疫对象[8]。
目前,国内外对桉树焦枯病菌的研究主要集中在病原菌形态学鉴定、分类、生物学特性、遗传性状、化学防治等方面,对于桉树焦枯病菌的快速检测暂无报道。因此,建立快速有效的分子生物学检测手段具有重要意义。Batuman 等[9]、Henriquez等[10]、Deng 等[11]分别利用PCR 以及基于PCR 的快速检测技术对番茄褪绿病毒(Tomatochloroticspotvirus)、菜豆根腐病(Fusariumcuneirostrum)和甘薯褪绿斑病毒(Sweetpotatochloroticfleckvirus)进行了有效的前期判断。本文以……
