魏春，刘利峰，孔令民

（浙江工业大学生物与环境工程学院，浙江 杭州 310014）

毕赤酵母生产重组β-半乳糖苷酶的指数补料分批发酵研究

魏春，刘利峰，孔令民

（浙江工业大学生物与环境工程学院，浙江 杭州 310014）

对毕赤酵母重组表达源于植物乳杆菌的β-半乳糖苷酶的5 L罐高密度发酵进行了研究。建立了甲醇指数补料动力学模型，并考察了不同比生长速率对β-半乳糖苷酶生产的影响。四个不同比生长速率（0.010/h，0.029/h，0.043/h和0.058/h）的甲醇指数补料分批发酵结果表明，比生长速率对β-半乳糖苷酶生产具有显著的影响。最大β-半乳糖苷酶产量60 U/mL在比生长速率为0.029/h时获得。采用指数补料分批发酵工艺的β-半乳糖苷酶产量优于常规策略下的产量，该工艺在甲醇诱导后期具有明显生产优势。

毕赤酵母；β-半乳糖苷酶；指数补料；比生长速率

β-半乳糖苷酶（β-galactosidase，EC 3.2.1.23），又称乳糖酶，能水解乳糖生成半乳糖和葡萄糖，可用于解决乳糖不耐症患者的乳品消费问题。另外，某些种类的β-半乳糖苷酶还兼具转半乳糖基作用，在合成半乳糖苷化合物，比如功能性低聚半乳糖（galacto-oligosaccharide，GOS）等产品方面具有重要应用价值［1］。不同微生物来源的β-半乳糖苷酶的酶学特性具有不同特点，适用于不同场合，因此寻求新的高效的β-半乳糖苷酶的研究仍是热点。植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum WZ011）作为益生菌，其β-半乳糖苷酶具有良好的应用潜力［2］。毕赤酵母分泌表达具有杂蛋白少、高表达量等优点［3］。因此，在毕赤酵母中表达生产植物乳杆菌来源的β-半乳糖苷酶并加以发酵优化，将是实现该酶大量生产的有效手段。……