傅安静，黄名英，高 艳，文 红

（1.成都农业科技职业学院，四川 成都611130 ；2.西南民族大学，四川 成都610041 ；3.成都温江区农法局动物检疫疾病控制中心，四川 成都 611130）

新城疫病毒（NDV）、高致病性禽流感病毒（AIV）、禽白血病病毒（ALV）、网状内皮增生症病毒（REV）严重危害养禽业。利用鸡胚成纤维细胞（CEF）探讨病毒与宿主相互作用的机制，对研究病毒感染及宿主抗病机理有重要意义。β连环蛋白（β-catenin）是Wnt/β-catenin 信号通路的一个关键参与者，Wnt/βcatenin 信号通路在细胞增殖分化、人类恶性肿瘤的发生发展中都有重要作用[1]。而有关病毒感染与Wnt/β-catenin 信号之间关系的研究多集中于丙型肝炎病毒（HCV）、人类疱疹病毒4 型(EBV)等致瘤性慢病毒，通过多种机制增加β-catenin 积累，激活其信号传导，从而促进细胞恶性转变及病毒感染伴随的癌症的发生[2-4]。ALV、REV感染后对β-catenin 表达的影响是否与人致瘤病毒相似；NDV、AIV感染后对βcatenin 表达的影响又如何，都未见文献报道。因此，本试验对这4 种病毒感染CEF 后β-catenin mRNA的动态表达进行检测，为探讨这几种病毒感染与机体的相互作用提供参考。

1 材料与方法

1.1 毒株和鸡胚 新城疫强毒株F48E9（NDVF48E9），购自中国兽医药品监察所；H5N1 亚型禽流感病毒（AIVH5N1）A/Duck/Guangdong/8/2001、禽网状内皮增殖症病毒（REV）SD9901 和禽白血病病毒（ALV）NX0101，均由中国动物卫生及流行病学中心提供。SPF 鸡胚，购自青岛易邦生物公司，由本实验室孵育至10 日龄后使用。

1.2 主要仪器 实时荧光定量PCR仪ABI 7300（ABI公司，美国）；凝胶成像系统Doc2000（Bio-Rad 公司，美国）；紫外分光光度计DU800（Beckman公司，美国）；高速冷冻离心（Eppendorf 公司，德国）。

1.3 主要试剂 SYBR®Premix ExTaqTM，购自日本TaKaRa 公司；TRIZol Reagent，购自Invitrogen 公司；RT-PCR 试剂盒，购自博瑞克公司；……