葛风华,张国明,刘春子,赖晓洁,曹 晶

(广东省深圳市宝安区中医院口腔科 518101)



·临床探讨·

老年牙周致病菌生长与血糖变化关系研究

葛风华,张国明,刘春子,赖晓洁,曹 晶

(广东省深圳市宝安区中医院口腔科 518101)

目的 探讨老年牙周致病菌与血糖之间的关系。方法 选取2013年1月至2014年12月在该院确诊的糖尿病(DM)患者50例、糖耐量异常患者50例及在门诊随机选取50例血糖正常的患者，检测其糖化血红蛋白、三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、口服糖耐量实验2 h的血糖浓度(2 hPG)、口腔中各种菌群分布(球菌、杆菌、丝状菌、梭状菌、弯曲菌、螺旋菌)、口腔中各种致病菌的分布情况及碱性磷酸酶(ALP)的活性。结果 三组受试者口腔内菌群分布结果显示，口腔中的球菌、杆菌、梭状菌和丝状菌的比较中，DM组和糖耐量异常组的值明显高于对照组，组间差异有统计学意义(P<0.05)。而弯曲菌和螺旋体的比较中，各组间差异无统计学意义(P>0.05)。对于口腔中的伴放线杆菌(Aa)、类杆菌(Bg)、卟啉单胞菌(Pg)、福塞类杆菌(Bf)值，DM组明显高于对照组(P<0.05)，糖耐量异常组的 Aa、Pg、Bg、Bf值明显高于对照组(P<0.05)，DM组的值也明显高于糖耐量异常组(P<0.05)。结论 血糖可以影响到牙周致病菌分布的异常，并促进致病菌的生长繁殖，且与血糖值呈正相关，所以临床上高血糖且口腔存在牙周炎的患者要严格控制血糖值。

牙周致病菌； 血糖； 相关性研究

在人体口腔中，约有500多种的细菌，即便是注意口腔卫生的人，也有大约500亿个细菌在口腔中，大多数的人有约2 000亿个细菌在口腔中，对于那些不注意清洁口腔的人，口腔中约有1万亿个细菌[1]。正常人体口腔中的菌群是存在微生态平衡的，但当口腔中细菌的微生态遭到破坏以后，会对牙周组织造成严重的损害且不可恢复[2]。糖尿病以其高发病率，逐渐得到人们的重视，在对糖尿病的研究中发现，糖尿病的发生和牙周病是存在一定关系的。在糖尿病的患者中，牙周病的发病率较高。因此，有学者认为牙周病是糖尿病的并发症之一。糖尿病(DM)患者长期处于高血糖的状态，易并发牙周炎症，而炎症又可作为慢性感染性疾病反过来促进DM病情的发展，而这种相互作用在老年患者中更加明显。本试验探讨老年牙周致病菌的生长与血糖变化之间的关系，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2013年1月至2014年12月50例确诊为DM的老年患者，其中男30例，女20例，年龄60～79岁，平均(68.03±5.14)岁，设为DM组；选取50例为糖耐量异常的患者，其中男25例，女25例，年龄61～78岁，平均(69.03±3.14)岁，设为糖耐量异常组；同时从门诊随机选取120例无血糖异常的老年人，其中男24例，女26例，年龄60～80岁，平均(67.19±6.04)岁，设为对照组。各组年龄等基本资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。

1.2 诊断标准 DM的诊断标准：空腹血糖(FPG)≥7.0 mmol/L;糖化血红蛋白(HbA1c)≥6.5%;口服糖耐量实验2 h的血糖浓度(2 hPG)≥11.1 mmol/L。糖耐量异常标准为餐后血糖7.8～11.1 mmol/L或FPG在6.1～7.0 mmol/L[3-4]。

1.3 排除情况 排除60岁以上患有急性感染、心肺功能障碍，出血性疾病、结缔组织病及治疗前1周内服用抗菌药物者[5]。

1.4 方法 对患者进行唾液采集前用清水漱口，用生理盐水将口中食物残渣清除，吹干后口中垫好棉球用来隔湿，再用浸过碘酊的棉球进行消毒。采用Full-mouth法取样位点:患者每个牙(第三磨牙除外)的近颊、颊侧中份、远颊、近舌/腭、舌/腭侧中份、远舌/腭6个位点作为Full-mouth法的取样位点。用无菌刮匙去除取样牙齿的龈上菌斑,无菌棉球隔湿、干燥,在取样位点处分别置入一根#40 标准灭菌纸尖,直至牙周袋底部,静置10 s后取出纸尖混合装入含有厌氧转送液的离心管中。同时记录取样位点的PD、附着丧失(AL)和探诊出血(BOP)。将采集的样本放入培养基，1 h内完成送检进行细菌培养。用直径为1 mm的取菌环在培养基上，在37 ℃培养48 h后取合适的菌株进行鉴定。选取放大倍数为1 000的显微镜，计数200个菌胞，分为球菌、杆菌、丝状菌、梭状菌、螺旋菌和弯曲菌6种，以百分比表示含量。将菌体接种于琼脂培养基和牛心脑浸液培养基中，采用以下培养条件进行细菌培养：在无氧环境下N2的浓度为80%,CO2的浓度为10%，H2的浓度为10%，37 ℃培养3～7 d。收集菌体，提取菌体DNA采用实时定量聚合酶链反应(PCR)的技术检测牙龈卟啉单胞菌(Pg)、核梭杆菌(Fn)、福塞类杆菌(Bf)、伴放线杆菌(Aa)。

2 结 果

2.1 两组检测指标比较 与对照组相比，DM组、糖耐量异常组TG、TC、HDL-C、LDL-C水平差异无统计学意义(P>0.05)。而FGB和2 hPG水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

2.2 各组口腔致病菌的在牙周的分布 三组受试者口腔内菌群分布结果显示，口腔中的球菌、杆菌、梭状菌和丝状菌的比较中，DM组和糖耐量组的值明显高于对照组，差异有统计学意义(P<0.05)。而弯曲菌和螺旋体的比较中，差异无统计学意义(P>0.05)。见表2。

2.3 不同组受试者口腔内牙周致病菌的培养情况 对于口腔中的Aa、Pg、Bg、Bf值，DM组明显高于对照组(P<0.05)，糖耐量异常组的 Aa、Pg、Bg、Bf值明显高于对照组(P<0.05)，DM组的值也明显高于糖耐量异常组(P<0.05)。

表1 两组检测指标比较

表2 不同组口腔内牙周菌群分布情况

3 讨 论

口腔内由于内环境复杂，存在相当多数量的细菌，种类繁多，有致病菌、条件致病菌、非致病菌。口腔中非致病菌主要影响口腔中牙菌斑的生成，而口腔中的致病菌则会引起牙周炎等疾病的发生。目前有充分证据证实的牙周致病菌有Aa、Pg、Bg、Bf、中间普氏菌(Pi)、中间型类杆菌(Bi)、Fn、直肠弯曲菌(Cr)、牙密螺旋体(Td)、微小消化链球菌、中间链球-复合体、结节真杆菌等。这些致病菌有明显的毒力或者致病性，可以通过多种机制干扰人体的防御能力，从而破坏牙周。但不是所有的致病菌都用于临床研究，目前临床上常检测Aa、Pg、Bg、Bf 4种[6-7]。

目前对于牙周致病菌微生物的检测，主要有以下几种方法：(1)像差/暗视野显微镜检查法；(2)酶为基础的试验；(3)核酸探针技术；(4)PCR技术；(5)免疫学试验。每种检测方法有其特有的特点，如像差/暗视野显微镜检测具有成本低易操作优点，但是其不能对有特异性的细菌鉴别。细菌培养的检测范围较宽，可以用于判断抗菌药物的敏感性，但其只能检测细菌，且耗时长，花费大。核酸探针技术可以用于检测种、亚类和毒力因子等，易于操作，但其设备昂贵而且不能判断其对抗菌药物的敏感性，PCR技术检测灵敏度高，速度快，但也不能检测对抗菌药物的敏感性[8-10]。

本研究结果表明，血糖情况与牙周致病菌之间的关系，口腔中的球菌、杆菌、梭状菌和丝状菌的比较中，DM组和糖耐量异常组的值明显高于对照组(P<0.05)，而对于口腔中的Aa、Pg、Bg、Bf值，DM组合糖耐量组明显高于对照组，糖耐量异常组的 Aa、Pg、Bg、Bf值明显高于对照组(P<0.05)，DM组的值也明显高于糖耐量异常组(P<0.05)。这也表明在临床上，要严格区分糖尿病患者和糖耐量异常患者。血糖可以影响到牙周致病菌分布的异常，并促进致病菌的生长繁殖，且与血糖值呈正相关，所以临床上高血糖且口腔存在牙周炎的患者要严格控制血糖值。

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10.3969/j.issn.1672-9455.2015.14.059

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