杨建蓉,杨 红

(甘孜藏族自治州人民医院传染科, 四川 甘孜 626000)



T-SPOT.TB和TST在结核诊断中的临床意义

杨建蓉※,杨 红

(甘孜藏族自治州人民医院传染科, 四川 甘孜 626000)

目的 探讨结核T细胞斑点检测(T-SPOT.TB)和皮肤结核菌素试验(TST)在结核诊断中的临床意义。方法 选取甘孜藏族自治州人民医院2012年4月至2014年1月收治的99例结核病疑似患者为研究对象，分别对患者采取T-SPOT.TB试验和TST进行检查，比较两种检测方法的诊断效能以探讨其临床意义。结果 T-SPOT.TB的特异度为17.2%，灵敏度为80.8%，阳性预测值为81.2%，阴性预测值为89.4%，准确度为84.2%。TST的特异度为79.3%，灵敏度为39.0%，阳性预测值为72.7%，阴性预测值为79.3%，准确度为67.4%。结论 结核病应用T-SPOT.TB诊断的准确度较TST试验更高，对结核病的诊断具有重要意义。

结核；结核T细胞斑点检测；结核菌素皮肤试验

我国是世界上结核病发病率较高的国家之一，疫情极为复杂[1]。目前对于结核病的诊断主要有皮肤结核菌素试验(tuberculin skin test，TST)、结核菌培养、结核抗体检测以及结核T细胞斑点检测(tuberculosis T cell spot detection，T-SPOT.TB)。结核菌培养是诊断结核病的金标准，但是其细菌培养速度慢，不能很好地满足及时诊断的要求。结核抗体检测的准确度虽然较其他方法高，但其因费用高、技术要求高等缺点不能广泛推广[2]。而T-SPOT.TB试验诊断是以抗原特异性T细胞反应为理论基础，价格经济，得到迅速推广。为探讨T-SPOT.TB和TST在结核诊断中的临床意义，本研究选取结核病疑似患者进行研究，现将结果报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2012年4月至2014年1月甘孜藏族自治州人民医院传染科收治的结核病疑似患者99例，男54例、女45例，年龄4～73 岁，平均(42±13)岁。最终共41例患者经痰培养确诊为结核病，其中包括肺结核22例，肾结核6例，结核性腹膜炎8例以及结核性脑膜炎5例，所有患者排除严重肝、肾功能疾病。

1.2 研究方法 99例患者均采取T-SPOT.TB试验和TST进行检查，并以细菌培养作为金标准。

1.2.1 TST试验 抽取0.1 mL结核菌纯蛋白衍生物注射液(成都生物制品研究所生产，批号：20120503)，于左侧前臂内侧按孟都法[3]注射，使注射部位形成皮丘。72 h后观察是否产生硬结以及测量硬结直径。

1.2.2 T-SPOT.TB试验 采用T-SPOT.TB试剂盒(上海复星科技有限公司生产，批号：20120708)进行检测，操作按说明书进行：首先用肝素钠抗凝管采集5 mL外周血常规分离，按密度梯度离心制备单个核细胞(离心半径1 cm，7000 r/min离心10 min)，洗涤后去除内源性γ干扰素。将所得样品加入抗γ干扰素抗体平板中，每孔100 μL。同时在阳性对照孔中加入5 mg/L的植物血凝素5 μL，而阴性对照孔不加刺激素。实验孔加蛋白培养滤液10和早期分泌靶性抗原6，并使其最终浓度达5 mg/L。取细胞悬液制备成1∶5细胞稀释液并计数，加样孵育16～20 h，培养完毕后立即洗板，分别加入检测抗体和亲和素各孵育1 h，显色后再次洗板，晾干后在显微镜下进行斑点计数，记录数据。

1.3 诊断标准

1.3.1 TST试验诊断标准 ①直径<5 mm者判定为阴性(-)；②直径5～9 mm判定为弱阳性(+)；③直径10～19 mm 判定为阳性(++)；④直径>20 mm为强阳性(+++)。

1.3.2 T-SPOT.TB试验诊断标准 阳性：①阴性对照斑点数0～5，且A或B孔斑点数-阴性斑点数≥6；②阴性对照斑点数≥6，A或B孔斑点数≥2倍阴性对照斑点数；阴性：A、B孔斑点数不符合阳性标准，但阳性对照反应良好。

1.4 统计学方法 应用SPSS 13.0统计软件进行数据分析。采用受试者工作特征曲线 (receiver operating characteristic curve，ROC曲线)对数据进行处理，比较两种方法的诊断效能。

2 结 果

99例结核疑似患者中41例确诊为结核病。T-SPOT.TB检测的灵敏度远高于TST，两种检测方法特异度相似，见表1、图1。

表1 T-SPOT.TB和TST在结核诊断中诊断效能比较 (%)

T-SPOT.TB：结核T细胞斑点检测;TST：结核菌素试验

图1 T-SPOT.TB、TST的受试者工作特征曲线图 T-SPOT.TB：结核T细胞斑点检测；TST：结核菌素试验

3 讨 论

自20世纪80年代以来，传染病大多得到有效的控制，但结核病仍在不断侵袭着人类的健康。据报道[3]，近年来结核病发病率不断攀升，对人类的身体健康造成严重威胁。我国作为人口大国，同时也是结核病高发国家，每年死于结核病的患者高达13万[3]。结核病的预防主要是早期发现、早期治疗，使患者病死率降低。早期、有效地诊断结核病能有效控制疾病传播，避免疾病扩散和发展。而结核病的误诊不仅可能延误病情，也可能因激素类药物的误用导致病情进一步加重。

TST、抗酸染色、结核菌培养、结核抗体检测以及T-SPOT.TB都是目前诊断结核病的主要途径[4]。结核菌培养阳性是结核病确诊的金标准，特异度较其他检测方法高，但其灵敏度则远不及结核抗体检测等方法。同时结核菌培养一般需要2～5周，不能给临床诊断提供及时、有效的细菌学证据。抗酸染色是检测结核病的一种重要方法，其通过检测患者痰标本中的结核菌数来提示结核病，特异度较高，但该法需要患者痰液中的结核菌数达到一定数量才能显示阳性，所以灵敏度较低。据曾春艳等[5]的研究指出，对91例结核患者痰液进行抗酸染色结核菌检测，发现仅有18例显示阳性，阳性率仅为19.78%。赵静等[6]的研究也指出，抗酸染色对肺外结核尤其不敏感，阳性率仅为33.62%。近年来分子生物学诊断也逐渐应用到结核病的临床诊断中，其主要通过聚合酶链反应试验检测结核菌核酸来提示是否感染结核菌，特异度和灵敏度都较为理想。但该试验对技术和试验条件要求较高，普通医院难以满足。同时其检测费用较其他检测手段高，可能增加患者经济负担，这些都是导致其没有得到广泛应用的原因。

T-SPOT.TB是近年来才应用到临床中的一种新的诊断手段。它是应用酶联免疫法刺激T细胞分泌细胞因子γ干扰素显色，通过计数致敏T淋巴细胞来检验是否感染结核菌。目前的报道都肯定了T-SPOT.TB检验的特异度和灵敏度[7]。对31例伴人类免疫缺陷病毒感染的结核病患者进行研究，发现传统皮肤结核菌素试验18例阳性，而T-SPOT.TB试验27例阳性，阳性率相差29.3%，并且指出T-SPOT.TB不被患者机体免疫情况影响。刘国威等[9]的研究也发现，T-SPOT.TB的灵敏度和特异度分别为91.2%和87.5%，均远高于其他检验方法。本研究结果显示，T-SPOT.TB检测的准确度高于TST，这与文献[9]报道结果较为一致。本研究中，两种检测方法特异度与文献报道并不一致，在高茜和杜黎明[10]的研究中，T-SPOT.TB的特异度较TST高14.9%，本研究认为这可能与本次研究样本较小有关。

综上所述，尽管目前T-SPOT.TB检测法还不能有效鉴别潜伏感染和活动性结核病，部分存在斑点数重叠现象，但其在结核病诊断中的灵敏度和准确度较TST试验更高，对结核病的诊断仍具有重要意义。

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[2] 彭春仙,郑晓燕,钱峰,等.T细胞斑点试验技术在结核病诊断方面的应用[J].中国卫生检验杂志,2011, 21(4):918-920.

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[4] 谢希,陈进伟,高洁生,等.结核感染T细胞斑点试验在结核诊断中的应用[J].临床内科杂志,2010，27(6):396-399.

[5] 曾春艳,张松旺,于长国.结核感染T细胞斑点试验在肾结核诊断中的应用研究[J].中国人兽共患病学报, 2013,29(5):1199-1202.

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[9] 刘国威,梅早仙,杜钟珍.T-SPOT.TB 在结核病诊断中的应用价值[J].天津医药,2012,40(9):926-928.

[10] 高茜,杜黎明.T淋巴细胞斑点试验在结核病诊断中的临床应用[J].临床肺科杂志,2012,17(12):2205-2207.

Clinical Value between T-SPOT.TB and TST in Diagnosis of Tuberculosis

YANGJian-rong,YANGHong.

(DepartmentofInfectiousDiseases,GanziPeople′sHospital,Ganzi626000,China)

Objective To investigate the clinical value between tuberculosis T cell spot detection (T-SPOT.TB) and tuberculin skin test(TST) in diagnosis of tuberculosis.Methods A total of 99 patients with suspected tuberculosis admitted in Ganzi People′s Hospital from Apr.2012 to Feb.2014 were chosen as the experimental objects.All the patients received T-SPOT.TB test and TST test,the sensitivity,specificity,and diagnostic capacity of the two methods were compared,and their clinical significance was explored.Results Thespecificity of T-SPOT.TB was 17.2%,the sensitivity was 80.8%,the positive predictive value was 81.2%,the negative predictive value was 89.4%,and the accuracy was 84.2%.While the specificity of TST was 79.3%,the sensitivity was 39.0%,the positive predictive value was 72.7%,the negative predictive value was 79.3%,the accuracy was 67.4%.Conclusion The diagnostic accuracy of T-SPOT.TB is higher than that of TST in the diagnosis of tuberculosis,therefore,T-SPOT.TB has greater significance the diagnosis of tuberculosis.

Tuberculosis; Tuberculosis T cell spot detection; Tuberculin skin test

R521.1

A

1006-2084(2015)12-2279-03

10.3969/j.issn.1006-2084.2015.12.065

2014-04-27

2014-11-26 编辑：相丹峰