牛伟涛

（邢台学院化学工程与生物技术学院，河北邢台 054001）

猪干扰素基因的克隆与原核表达载体的构建

牛伟涛

（邢台学院化学工程与生物技术学院，河北邢台 054001）

干扰素(Interferon)是一种广谱抗病毒剂，具有抗肿瘤、抗病毒和免疫调节等多种作用而被广泛应用于病毒性疾病的预防和治疗。本实验以猪肝脏组织为材料，提取猪肝脏组织DNA，根据GenBank收录的猪干扰素基因序列设计特异性引物，以猪肝脏DNA为模板进行高保真扩增得到IFN基因的ORF片段，然后进行了T载体克隆。再利用引入EcoRⅠ、SalⅠ酶切位点的特异性引物对IFN成熟肽段的基因进行亚克隆，经双酶切、连接、转化后，成功构建了pET28a-ifn原核表达重组质粒，为干扰素基因的原核表达奠定了基础。

猪干扰素基因；基因克隆；表达载体构建

干扰素是一种细胞因子，具备免疫调节、抗病毒和抗肿瘤等作用，它是科学家在1957年研究流感病毒干扰现象时发现的[1]。干扰素是一类分泌型糖蛋白，它主要通过与细胞表面受体相互作用从而使细胞、组织或器官产生一种或几种抗病毒的蛋白，这样便可以增强免疫应答[2]。干扰素主要由激活的胸腺细胞和自然杀伤细胞产生，病毒入侵时，干扰素在短时间内就能让机体处于抗病毒形态，并使机体在1～3周时间内抵制病毒反复感染[3]。生物体中广泛存在干扰素，人、猪、羊等哺乳动物都产生干扰素。我国猪场众多，大小猪病毒性传染病随季节变化危害较大，种类繁多，给很多养殖户造成巨大损失，干扰素就成为医药、兽药市场最具发展前景的一类生物制剂[4]。……