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酶标仪双波长与单波长比色测定HBsAg的比较

2015-02-01龚洪波

中国社区医师 2015年3期
关键词:影响检测

龚洪波

432819湖北省大悟县新城中心卫生院

酶标仪双波长与单波长比色测定HBsAg的比较

龚洪波

432819湖北省大悟县新城中心卫生院

目的:寻找一种更加准确和重复性较好的酶标仪检测的方法。方法:对酶标仪双、单波长进行准确性和重复性进行比较。结果:CV的单波长3.45%,CV的双波长1.86%,两者的差距十分大,单波长的CV数值是远远大于双波长,但是两者的灵敏度却是十分相同的。结论:在采用酶标仪比色时,应该使用双波长进行检测,进而使试验分析的准确度更确切,降低实验中出现的误差。

酶标仪;HBsAg;双波长

使用酶标仪对e抗进行检测,在选择双、单波长使用方面进行研究分析,供大家参考。当使用酶标仪判定HBsAg的结果时,我们会相应地发现用单波长比色测定会促进部分弱阳性样品漏检,而采用双波长比色测定则可进一步减少相应现象的发生。

资料与方法

HBsAg试剂盒为上海某公司。

DRG-3000型酶标仪,美国某公司产。

将HBsAg阳性对照血清倍比稀释1:2,1:4,1:8,1:16,1:32,1:64后进行测定。

标本:257例患者血清。

方法:稀释样品100 μL加入反应孔,37℃25 min,洗孔后加酶结合物100 μL,37℃25 min,洗孔后加显色剂100 μL,37℃10 min,加终止液50 μL终止反应,单波长用450 nm滤色片,双波长用450 nm为主波长,630 nm为副波长,实验同时设阴、阳性对照。样品吸光度(A)/CO≥2.1判定为阳性(按说明书规定,CO=4.0×阴性对照吸光度值,若阴性对照吸光度<0.05则以0.05计算)。

结果

倍比稀释的阳性对照血清测定结果,单波长法A值2.846,2.437,1.806,1.580,1.438,0.350(CO 1.068),即仅1: 2、1:4阳性。双波长法 A值 2.641,2.528,2.475,2.286,2.262,2.188(CO 1.002)即1:2、1:4、1:8、1:16均阳性。

257例患者血清测定两法结果一致的252例,5例不同的结果单波长法A值1.978,1.877,1.604,1.354,1.022,全阴性;……

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