莲心碱固体分散体的表征及体外溶出度的测定

2015-01-18唐婷，严航，周江，桂卉

中成药 2015年8期

关键词：莲心溶出度混合物

唐婷，严航，周江，桂卉

（湖南中医药大学药学院，湖南长沙410208）

莲心碱固体分散体的表征及体外溶出度的测定

唐婷，严航，周江，桂卉*

（湖南中医药大学药学院，湖南长沙410208）

目的对莲心碱固体分散体的溶出度进行测定，并探明莲心碱在固体分散体中存在的状态。方法以PVP-K30为载体材料，溶剂法制备莲心碱固体分散体，通过显微电镜扫描法、红外光谱法、差示量热扫描法及X-ray衍射法对莲心碱固体分散体的结构进行鉴定，并进行体外溶出度测定。结果将药物制成固体分散体后，莲心碱以无定形状态分散在PVP-K30载体材料中；与原料药及物理混合物相比，固体分散体的溶出度、溶出速率均有明显提高。结论将莲心碱制备成固体分散体后，可显著提高莲心碱的溶出度及溶出速率，为莲心碱相关制剂的研发及临床应用奠定了基础。

莲心碱；固体分散体；结构表征；溶出度

莲心碱（1iensinine）是睡莲科植物莲（Nelumbo nucifera Gaertn）的莲子心中含有量较高的一种双苄基异喹啉类生物碱，具有降压、抗心律失常［1-2］、抗氧化、降低血清总胆固醇等药理作用。由于莲心碱难溶于水，溶出速度慢，生物利用度低，极大地限制了其在临床上的应用。本实验采用固体分散技术，以亲水性载体材料PVP-K30为载体，采用溶剂法制得莲心碱固体分散体，通过X射线衍射法、红外光谱法、差示量热扫描法、显微成像法对其结构进行表征，探明莲心碱在固体分散体中存在的状态，并对其体外溶出度进行考察，为莲心碱相关制剂的研发及临床应用奠定基础，为固体分散技术用于提高难溶性药物的溶出度和生物利用度提供实验依据。

1 仪器与试药

1.1 仪器 ZRS-8G型溶出仪（天津大学无线电厂）；756PC型紫外分光光度仪（上海奥普勒有限公司）；DF-101S型集热式恒温加热磁力搅拌器（巩义市予华有限责任公司）；CP-114型电子分析天平（上海奥豪斯公司）；傅里叶红外扫描仪（FTIR-8000）；X衍射扫描仪（北京宏昌信科技有限公司：XRD系列）；REM电子扫描仪（FEI公司：Quanta-200）；差示量热扫描仪（NETZSCH STA 499 C）。

1.2 试药固体分散体自制（莲心碱的纯度为50%）；莲心碱对照品（上海源叶生物有限公司，纯度≥98%，批号20121122）；聚乙烯吡咯烷酮（PVP-K30）上海源叶生物科技有限公司）；其他试剂均为分析纯。

2 方法

2.1 标准曲线的绘制精密称取莲心碱对照品适量，用pH 6.8磷酸盐缓冲液配制成 0.005、0.010、0.015 0、0.200、0.250、0.030 mg/m L的系列标准溶液，于282 nm处，以质量浓度为横坐标，吸光度值为纵坐标，进行线性回归，绘制标准曲线，得回归曲线：Y=13.086X+ 0.018 3，r=0.999 6。结果表明莲心碱对照品溶液在0.005～0.03 mg/mL范围内线性关系良好。

2.2 供试品的制备

2.2.1 固体分散体的制备［3］称取莲心碱和PVP-K30各1 g，加15 mL甲醇溶解，超声处理10 min后，混合，磁力搅拌30 m in，挥干溶剂，40℃真空干燥，粉碎，过80目筛，制得莲心碱固体分散体。

2.2.2 莲心碱/PVP-K30的物理混合物的制备将莲心碱与PVP-K30以质量比1∶1的比例准确称量后，置于研钵中充分混合，得到莲心碱/PVP-K30物理混合物。

2.3 体外溶出度的测定按照《中国药典》2010年版二部附录XC中溶出度测定方法第一法（浆法）测定溶出度。以pH=6.8的磷酸盐缓冲液为溶出介质，温度（37± 0.5）℃，转速为100 r/min，取适量的固体分散体、莲心碱、莲心碱与PVP载体的物理混合物（相当于含莲心碱1.0mg），分别于0、3、8、10、20、30、45 min时取样7 mL（取后立即补充等量的溶出介质），过0.45μm的微孔滤膜，取滤液作为供试品，在282 nm处测定其吸光度值，求算累积溶出百分率。

2.4 莲心碱固体分散体结构表征

2.4.1 显微扫描电镜加速电压20 kV，放大倍数2 000倍，分别对莲心碱、PVP-K30、莲心碱/PVP-K30物理混合物及莲心碱固体分散体进行显微电镜扫描。

2.4.2 傅里叶红外光谱鉴别将莲心碱，PVP-K30，莲心碱/PVP-K30物理混合物、莲心碱固体分散体用KBr压片，分别在4 000～400 cm-1处检测红外吸收光谱。

2.4.3 差示扫描量热分析将莲心碱、PVP-K30、莲心碱/PVP-K30物理混合物及莲心碱固体分散体分别封闭在铝盘中，调节温度，以10℃/min的速度升温，在30～300℃范围内进行差示量热扫描。

2.4.4 X-ray衍射分析在室温条件下，采用Cu靶，KA线，加速电压为40 kV，扫描范围5°～75°，扫描速度8°/min。采用压片法制片，分别对莲心碱、PVP-K30、莲心碱/PVP-K30物理混合物及莲心碱固体分散体的粉末进行X衍射扫描分析。

3 实验结果

3.1 体外溶出度及溶出曲线莲心碱固体分散体、莲心碱原料药及莲心碱/PVP-K30物理混合物（1∶1）在45 min的溶出度及累积溶出曲线见图1。由图可知，与莲心碱原料药及莲心碱/PVP-K30物理混合物比较，莲心碱固体分散体在溶出介质中的溶出度、溶出速率都有较明显提高。45 min时莲心碱固体分散体的累积溶出百分率达到了88.02%，为莲心碱原料药的 4.71倍，物理混合物的6.55倍。

3.2 显微扫描电镜莲心碱、PVP-K30、莲心碱/PVP-K30物理混合物、莲心碱固体分散体显微扫描电镜结果见图2。由图2可知，在莲心碱与PVP-K30物理混合物中，两种物体只是物理混合，而在固体分散体中，莲心碱高度分散在PVP-K30中，从而掩盖了莲心碱晶体状形状，说明莲心碱固体分散体已经形成，药物以非晶体的状态存在于固体分散体中，能够提高药物的溶出度。

3.3 傅里叶红外光谱莲心碱、PVP-K30、莲心碱/PVPK30物理混合物、莲心碱固体分散体的红外光谱图见图3。由图3可知，莲心碱固体分散体（d）与PVP-K30（b）在2 370 cm-1处的-COCH3伸缩振动吸收峰和3 365 cm-1附近的-OH伸缩振动吸收峰的峰型相似，但在3 456 cm-1处的-OH伸缩振动吸收峰发生了明显的红移，且药物的吸收强度降低，可能是莲心碱和PVP-K30之间发生了结合作用，且以氢键结合，从而降低了药物与PVP-K30之间的键能。此外，固体分散体中莲心碱在2 370 cm-1处的特征峰被遮蔽，说明莲心碱固体分散体已经形成，且并非物理混合［4-5］。

图2 显微扫描电镜结果

图3 莲心碱/PVP-K 30红外吸收图谱

3.4 差示扫描量热分析莲心碱、PVP-K30、莲心碱/ PVP-K30物理混合物、莲心碱固体分散体的差示扫描升温曲线见图4。由图4可知，莲心碱/PVP-K30物理混合物在115°和83°两点处的特征峰，分别为莲心碱与载体PVP-K30的熔点峰。而固体分散体中莲心碱的115°处的熔点峰消失了，只剩下PVP-K30的熔点峰。莲心碱熔点峰的消失或者减少表明莲心碱是以非晶态均匀分散在PVP-K30中，即形成了分散体［6-7］。

图4 差示量热扫描图

3.5 X-Ray衍射分析莲心碱、PVP-K30、莲心碱/PVPK30物理混合物、莲心碱固体分散体的粉末衍射结果见图5。由图5可知，莲心碱在12.5°、30.12°、52.66°处有强度的吸收，在40.06°也有吸收，PVP-K30在5°～75°范围内有13.54°、22.54°两处较大的衍射峰；莲心碱与PVP-K30物理混合物则为两者的结合，保留了莲心碱与PVP-K30的所有特征峰；而莲心碱固体分散体中莲心碱的特征晶体的衍射峰全部消失，仅保留了PVP-K30的两个特征峰，证明莲心碱是以非晶状态均匀分散在载体中，形成了固体分散体［8］。

图5 X-Ray衍射图谱

4 结果与讨论

体外溶出实验显示莲心碱固体分散体的溶出度大于其物理混合物，大于莲心碱原料药，故将莲心碱制备成固体分散体能够增大其溶出度及溶出速率。

以PVP-K30为载体制备莲心碱固体分散体，可明显增加药物莲心碱的溶出度，究其原理，可能与莲心碱在固体分散体中状态的改变有关。显微电镜扫描法分析结果显示，莲心碱/PVP-K30物理混合物中，两者仅为物理混合，而莲心碱以非晶体的状态存在于固体分散体中；由红外色谱扫描图可知，在固体分散体中，莲心碱特征峰被载体所遮蔽，以高度分散的状态存在于载体材料中；通过差示量热扫描分析显示，在固体分散体中莲心碱的115°处的熔点峰消失，只剩下PVP-K30的熔点峰，说明莲心碱与载体发生了相互作用，使莲心碱的晶体结构发生改变；由X-ray衍射图谱可知，莲心碱的特征衍射峰清晰可见，而固体分散体的衍射峰仅为一条宽带，说明在固体分散体中，莲心碱的晶体已经完全消失，而以高度分散的状态分散在载体材料中，从而提高莲心碱的溶出度及溶出速率。

以PVP-K30为载体材料，采用溶剂法制得固体分散体能显著提高莲心碱的溶出度及溶出速率，对于将莲心碱制成固体分散体是否能提高其在体内的生物利用度，将通过进一步的实验进行研究。

［1］许磊，姚崇舜，陈济民.莲心碱的研究概况［J］.中草药，2000，31（12）：956-958.

［2］王辉，刘刚，罗顺德.莲心碱对血小板聚集-凝血功能和血栓形成的影响［J］.中国药理学通报，2010，26（6）：768-772.

［3］唐婷，彭买姣，周江.莲心碱固体分散体的制备工艺研究［J］.湖南中医药大学学报，2014，34（4）：17-20.

［4］郭波红，黄嘉敏，李晓芳，等.头孢地尼-聚乙烯吡咯烷酮固体分散体的制备［J］.医药导报，2013，32（8）：1072-1075.

［5］阮氏越秋，赵浩如.齐墩果酸固体分散体的制备及体外溶出度测定［J］.中国药科大学学报，2003，34（3）：236-239.

［6］王曙宾，黄兰芷.葛根素固体分散体的分散状态及其体外评价［J］.中草药，2007，38（11）：1632-1634.

［7］姜官鑫，沈国清，朱鸿林，等.阿维菌素缓释固体分散体的制备及其性能研究［J］.科技通报，2012，28（5）：125-129.

［8］韩刚，阎林奇，索炜，等.大黄素固体分散体的制备及其溶出度测定［J］.中草药，2011，42（3）：487-490.

R927.11

1001-1528（2015）08-1853-03

10.3969/j.issn.1001-1528.2015.08.051