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miRNA-29a对平滑肌细胞增殖凋亡的影响

2015-01-09冯洪涛李红普

重庆医学 2015年35期
关键词:血清检测

冯洪涛,李红普

(河南郑州市人民医院普外二科 450000)

论著·基础研究

miRNA-29a对平滑肌细胞增殖凋亡的影响

冯洪涛,李红普△

(河南郑州市人民医院普外二科 450000)

目的 检测miRNA-29a在腹主动脉瘤患者与正常人血清中的表达差异,探讨miRNA-29a过表达对人腹主动脉平滑肌细胞(HVSMCs)增殖凋亡的影响。方法收集该院2011年3月至2014年3月间确诊腹主动脉瘤患者血清标本25例,平均年龄(62.9±13.6)岁;同期收集与其年龄相匹配的正常老年人血清标本25例,平均年龄(61.5±11.8)岁。用RT-PCR分别检测其miRNA-29a表达。构建人重组慢病毒载体MCS-CMV-miRNA;将构建载体MCS-CMV-miRNA-29a转染HVSMCs细胞,荧光显微镜下观察其转染效率,RT-PCR及Western blot法检测转染后各组细胞中miRNA-29a和miRNA-29a靶基因COL1A1的表达,最后应用Annexin V/7-AAD双染法检测转染后72 h对HVSMCs细胞凋亡的影响。结果在腹主动脉瘤患者中miRNA-29a表达较正常人低。构建的重组慢病毒载体MCS-CMV-miRNA-29a转染效率为(74.25±10.10)%,转染后miRNA-29a及蛋白表达在靶细胞较对照组增多,MTS及Annexin V显示miRNA-29a过表达后细胞增殖增多,凋亡减少。结论成功构建携带miRNA-29a慢病毒载体,转染后miRNA-29a稳定表达,miRNA-29a过表达可促进细胞增殖,抑制其凋亡。

主动脉瘤,腹;miRNA-29a;慢病毒载体;肌细胞,平滑肌

腹主动脉瘤(abdominal aortic aneurysm,AAA)是指由于腹主动脉壁的病变或损失,造成腹主动脉的局限性扩张、膨出,以搏动性肿块为主要症状的疾病。通常将腹主动脉段动脉壁三层结构持续性扩张至肾动脉处腹主动脉直径1.5倍以上即定义为AAA,是一种常见的高病死率动脉退行性疾病[1-2]。目前,对于腹主动脉瘤具体发病机制尚不完全清楚,已有的报道显示其发病与遗传因素、炎症、蛋白酶降解、平滑肌细胞凋亡等因素密切相关,其发病与其他肿瘤因化学辐射、基因突变等不同。……

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