张颖

摘要：试验采用水提醇沉法，以菘蓝（Isatis minima Bunge）叶和根粉末为原料，以料液比（m/V，g∶mL）、提取温度、提取时间为考察因素，通过单因素试验比较得出，菘蓝根、叶中多糖的最佳提取条件为料液比1∶25，在80～95 ℃条件下提取2～3 h，其中根中的得率要高于叶中。通过正交试验进一步研究得出影响菘蓝根多糖提取的因素依次为料液比、提取温度、提取时间，即料液比为1∶25，提取时间3.5 h，提取温度95℃，在此条件下菘蓝根多糖得率为3.93%。

关键词： 菘蓝（Isatis minima Bunge）;多糖;正交试验;提取工艺

中图分类号：TS201.2        文献标识码：A        文章编号：0439-8114（2014）12-2886-03

Extraction of Polysaccharide from the Leaves and Roots of Isatis Tinctoria

ZHANG Ying1，2

（1. Panzhihua University， College of Biological and Chemistry Engineering， Panzhihua 617000， Sichuan， China;2. Key Laboratory of Dry-hot Valley Characteristic Bio-Resources Development at university of Sichuan Province， Panzhihua 617000， Sichuan， China）

Abstract： The effects of liquid ratio， temperature and time on polysaccharide extraction were investigated through orthogonal design after three single factor experiments. The test showed that the optimal liquid ratio was 1∶25， extracted for 2～3 h under the temperature of 80～95℃. Through comparative studies， the extraction of polysaccharide from isatis tinctoria root was better.The optimum extraction conditions were as follows： liquid ratio 1∶25，extracting time 3.5 h， temperature 95 ℃， and the polysaccharide content could reach 3.93%.

Key words： isatis tinctoria （Isatis minima Bunge）; polysaccharide; orthogonal design; extraction

大青叶和板蓝根系常用中药，具有清热解毒、凉血利咽的功效，分别为十字花科植物菘蓝（Isatis minima Bunge）的叶和根。板蓝根利咽功效较好，而大青叶凉血化斑之功效较好。有关大青叶和板蓝根有效成分的研究多集中在靛蓝、有机酸等[1，2]几个方面。多糖作为大青叶和板蓝根的有效成分之一，具有免疫调节、抗肿瘤等作用。由于多糖从作用机理到临床研究等方面的应用增多，多糖的提取分离及鉴定技术具有较大的应用价值，能为大青叶和板蓝根多糖的功能食品与新药开发及大青叶的质量控制打下技术基础[3-5]。多糖的提取分离方式主要有水煎煮法、酸碱提取法、酶法、超临界流体法和超声波法，含量测定主要采用双波长薄层扫描法、紫外分光光度法和高效液相色谱测定法等[6-11]。综合经济原则，本研究尝试采用水提醇沉法，利用单因素试验和正交试验比较菘蓝叶和根多糖提取的工艺条件。

1  材料与方法

1.1  材料

菘蓝植株购于攀枝花市仁和区种植基地，分别取叶和根洗净，60 ℃烘干，粉碎后过60目筛，得干粉备用。

1.2  试剂

石油醚、无水乙醇、无水葡萄糖、乙醚、浓硫酸购于成都市科龙化工试剂厂，苯酚购于天津市化学试剂厂六厂，以上试剂均为分析纯。

1.3  仪器

722型紫外分光光度计（上海精密科学仪器有限公司）;60M AQM-100型纯水仪（北京中西远大科技有限公司）;CP324S型分析天平（金紫光科技发展有限公司）;HH-8型数显恒温水浴锅（郑州杜甫仪器厂）;02-2AB型电热恒温干燥箱（北京中兴伟业仪器有限公司）。

1.4  方法

1.4.1  葡萄糖标准液的配制  准确称取105 ℃干燥至恒重的无水葡萄糖100 mg，用去离子水溶解并准确定容至100 mL，再稀释10倍，即得100 μg/mL的葡萄糖标准液。用吸量管准确移取苯酚5 mL，去离子水稀释定容至100 mL，即得5 %苯酚液，棕色瓶中避光保存。

分别取0.1、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0 mL葡萄糖标准溶液定容至2.0 mL，加入5 %苯酚溶液1 mL和浓硫酸5 mL混匀，置于沸水浴中保温8 min，冷却于室温后静置15 min。以空白试液为对照，在最大吸收波长485 nm处测定吸光度，每组测定3次。以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标绘制标准曲线，并求回归方程。endprint

1.4.2  多糖提取工艺  提取工艺流程为：原料→粉碎→脱脂→热水浸提→取上清液→二次提取→合并上清液→醇沉→有机溶剂醇洗涤→干燥→粗多糖成品。

准确称取备用叶或根样品10 g，置于索氏回流器中，经一定量的乙醚回流抽提脱脂2次，每次2 h。取药渣，置于带塞锥形瓶中，按照设定的料液比加去离子水，设定并保持温度恒定，在水浴锅中进行搅拌提取。将提取液冷却至室温，抽滤，将滤渣进行二次提取（与第一次提取条件相同），合并滤液，减压浓缩，加人95 %乙醇至含醇量80 %[11]，静置24 h后抽滤得沉淀，用无水乙醇和乙醚反复洗涤沉淀数次，60 ℃恒温干燥，得到粗多糖。

1.4.3  单因素试验  分别称取叶和根10 g，分别在提取温度为60、70、80、90、100 ℃，提取时间为1、2、3、4、5 h，料液比为1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40（m/V，g∶mL，下同）条件下提取2次，每组重复3次，得出最佳提取条件。

1.4.4  正交试验  在单因素试验的基础上，选择料液比、提取温度和提取时间作3因素3水平的正交试验，每组3次重复，以菘蓝根多糖得率为考察指标，对多糖的提取工艺条件进行优化，因素与水平见表1。

1.4.5  多糖含量测定  取干燥至恒重的粗多糖样品100 mg，定容至100 mL再稀释10倍，吸取样品溶液2 mL于10 mL试管中，以制作标准曲线的方法操作。测定其吸光度并带入回归方程计算叶和根中多糖在原料中的得率。多糖得率计算公式如下：

多糖得率=■×100%

式中，Vs=100 mL;n为稀释倍数;C为样品溶液中多糖浓度（μg/mL）;W0为称取样品质量（g）;M粗=提取粗多糖质量（g）;M料为大青叶原料质量（g）。

2  结果与分析

2.1  标准曲线绘制

取吸光度对葡萄糖液浓度进行线性回归，得回归方程及标准曲线（图1）。

2.2  单因素试验结果

2.2.1  料液比对多糖得率的影响  由图2可知，随着料液比的降低，多糖得率呈上升趋势，当料液比达到1∶25左右，多糖得率较高，再继续增加溶剂量，多糖得率变化不大。如果去离子水用量过多，不利于以后的浓缩分离，而且增加醇沉中的醇用量，故选择1∶25为适合的料液条件，以根为原料的多糖得率稍高于叶。

2.2.2  提取温度对多糖得率的影响  提取温度从60 ℃升高到80 ℃时，多糖的得率迅速增加，超过80 ℃多糖的得率变化平缓，而温度达到95 ℃之后多糖的得率变化甚至有降低的趋势（图3）。其原因可能是温度过低，溶剂的渗透能力和溶解能力差，多糖不能有效溶出;温度过高虽对细胞的破坏作用增大，有利于多糖的浸出，但是会导致多糖裂解，使得多糖得率降低。故提取温度选择80～95 ℃时效果较好，以根为原料的提取结果稍高于叶。

2.2.3  提取时间对多糖得率的影响  随着提取时间的延长，多糖的得率逐渐增加（图4），提取3 h后多糖得率增加缓慢。考虑到时间过长会导致多糖结构破坏和降解，故提取时间选择2～3 h，以根为原料的提取结果稍高于叶。

2.3  正交试验

正交试验结果见表2，由表2可知，各因素对菘蓝根多糖得率影响大小依次为料液比、提取温度、提取时间。确定最佳提取工艺条件为A2B3C3，即在料液比1∶25时提取2次，每次3.5 h，提取温度95 ℃。在此最佳组合工艺条件下验证，多糖得率为3.93%。

3  小结与讨论

本试验以菘蓝叶和根为原料，通过单因素试验得出菘蓝根、叶中多糖的最佳提取条件为料液比1∶25，在80～95 ℃条件下提取2～3 h，根中多糖得率高于叶中，通过正交试验得在料液比1∶25，95 ℃下提取3.5 h时菘蓝根中多糖得率为3.93%。

多糖可溶于水，在多糖的水溶液中加入乙醇会破坏多糖与水形成的氢键，降低多糖溶解度，使多糖以沉淀形式析出。利用多糖的这一性质，可将多糖从水溶液中沉淀出来。相比酶提法、超声法和超临界萃取法等，传统的水提醇沉法有利于节约提取成本和某些负效应，如酶法降解副产物对提取会有影响，超声波的凝聚作用以及热点作用下多糖的降解问题等[4，5]。本试验中菘蓝根多糖得率高于叶多糖得率[12-15]，与其他研究结果一致。影响多糖得率的因素复杂，包括料液比、提取时间、提取温度、提取次数、醇沉浓度、醇沉时间等，本研究仅取前三个常见因素作正交优选。今后有必要就工艺纯化方面和提取工艺中的其他因素的影响效果做深入研究。

参考文献：

[1] 柳继风，张雪梅，薛多清，等.大青叶的化学成分研究[J].中国中药杂志，2006，31（23）：1961-1965.

[2] 赵晓娟，李  琳，刘  雄，等.大青叶的本草学研究、化学成分及药理作用研究概况[J].甘肃中医学院学报，2011，28（5）：61-64.

[3] 尹  艳，高文宏，于淑娟.多糖提取技术的研究进展[J].食品工业科技，2007，28（2）：248-250.

[4] 张智芳，林文庭，陈灿坤.植物多糖提取工艺的研究进展[J].海峡预防医学杂志，2008，14（3）：18-20.

[5] 王雪冰，赵天瑞， 樊  建.食用菌多糖提取技术研究概况[J].中国食用菌，2010，29（2）：3-6.

[6] 徐翠莲，杜林洳，樊素芳，等.多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法研究[J].河南科学，2009，27（12）：1524-1529.

[7] 方积年，丁  侃.天然药物-多糖的主要生物活性及分离纯化方法[J].中国天然药物，2007，5（5）：338-347.

[9] 李晓冰，赵宏艳，郭  栋.灵芝多糖药理学研究进展[J].中成药，2012，34（2）：332-335.

[10] 吴  梅，谭  睿.黄芪多糖研究进展[J].川北医学院学报，2013，28（1）：17-22.

[11] 齐香君.现代生物制药工艺学[M].北京：化学工业出版社，2009.

[12] 高续春.多糖提取纯化方法研究进展[J].榆林学院学报，2009，19（4）：65-67.

[13] 张体祥，刘  捷，张  萍，等.板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究[J].时珍国医国药，2009， 20（8）：1992-1994.

[14] 陈  奎，陈易彬. 板蓝根多糖提取工艺的研究[J].食品研究与开发，2007，28（4）：57-59.

[15] 张  萍，刘  捷，邓扬悟，等.板蓝根多糖的提取工艺及其清除自由基作用的初步研究[J].河南工业大学学报（自然科学版），2006，27（3）：36-38.endprint

1.4.2  多糖提取工艺  提取工艺流程为：原料→粉碎→脱脂→热水浸提→取上清液→二次提取→合并上清液→醇沉→有机溶剂醇洗涤→干燥→粗多糖成品。

准确称取备用叶或根样品10 g，置于索氏回流器中，经一定量的乙醚回流抽提脱脂2次，每次2 h。取药渣，置于带塞锥形瓶中，按照设定的料液比加去离子水，设定并保持温度恒定，在水浴锅中进行搅拌提取。将提取液冷却至室温，抽滤，将滤渣进行二次提取（与第一次提取条件相同），合并滤液，减压浓缩，加人95 %乙醇至含醇量80 %[11]，静置24 h后抽滤得沉淀，用无水乙醇和乙醚反复洗涤沉淀数次，60 ℃恒温干燥，得到粗多糖。

1.4.3  单因素试验  分别称取叶和根10 g，分别在提取温度为60、70、80、90、100 ℃，提取时间为1、2、3、4、5 h，料液比为1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40（m/V，g∶mL，下同）条件下提取2次，每组重复3次，得出最佳提取条件。

1.4.4  正交试验  在单因素试验的基础上，选择料液比、提取温度和提取时间作3因素3水平的正交试验，每组3次重复，以菘蓝根多糖得率为考察指标，对多糖的提取工艺条件进行优化，因素与水平见表1。

1.4.5  多糖含量测定  取干燥至恒重的粗多糖样品100 mg，定容至100 mL再稀释10倍，吸取样品溶液2 mL于10 mL试管中，以制作标准曲线的方法操作。测定其吸光度并带入回归方程计算叶和根中多糖在原料中的得率。多糖得率计算公式如下：

多糖得率=■×100%

式中，Vs=100 mL;n为稀释倍数;C为样品溶液中多糖浓度（μg/mL）;W0为称取样品质量（g）;M粗=提取粗多糖质量（g）;M料为大青叶原料质量（g）。

2  结果与分析

2.1  标准曲线绘制

取吸光度对葡萄糖液浓度进行线性回归，得回归方程及标准曲线（图1）。

2.2  单因素试验结果

2.2.1  料液比对多糖得率的影响  由图2可知，随着料液比的降低，多糖得率呈上升趋势，当料液比达到1∶25左右，多糖得率较高，再继续增加溶剂量，多糖得率变化不大。如果去离子水用量过多，不利于以后的浓缩分离，而且增加醇沉中的醇用量，故选择1∶25为适合的料液条件，以根为原料的多糖得率稍高于叶。

2.2.2  提取温度对多糖得率的影响  提取温度从60 ℃升高到80 ℃时，多糖的得率迅速增加，超过80 ℃多糖的得率变化平缓，而温度达到95 ℃之后多糖的得率变化甚至有降低的趋势（图3）。其原因可能是温度过低，溶剂的渗透能力和溶解能力差，多糖不能有效溶出;温度过高虽对细胞的破坏作用增大，有利于多糖的浸出，但是会导致多糖裂解，使得多糖得率降低。故提取温度选择80～95 ℃时效果较好，以根为原料的提取结果稍高于叶。

2.2.3  提取时间对多糖得率的影响  随着提取时间的延长，多糖的得率逐渐增加（图4），提取3 h后多糖得率增加缓慢。考虑到时间过长会导致多糖结构破坏和降解，故提取时间选择2～3 h，以根为原料的提取结果稍高于叶。

2.3  正交试验

正交试验结果见表2，由表2可知，各因素对菘蓝根多糖得率影响大小依次为料液比、提取温度、提取时间。确定最佳提取工艺条件为A2B3C3，即在料液比1∶25时提取2次，每次3.5 h，提取温度95 ℃。在此最佳组合工艺条件下验证，多糖得率为3.93%。

3  小结与讨论

本试验以菘蓝叶和根为原料，通过单因素试验得出菘蓝根、叶中多糖的最佳提取条件为料液比1∶25，在80～95 ℃条件下提取2～3 h，根中多糖得率高于叶中，通过正交试验得在料液比1∶25，95 ℃下提取3.5 h时菘蓝根中多糖得率为3.93%。

多糖可溶于水，在多糖的水溶液中加入乙醇会破坏多糖与水形成的氢键，降低多糖溶解度，使多糖以沉淀形式析出。利用多糖的这一性质，可将多糖从水溶液中沉淀出来。相比酶提法、超声法和超临界萃取法等，传统的水提醇沉法有利于节约提取成本和某些负效应，如酶法降解副产物对提取会有影响，超声波的凝聚作用以及热点作用下多糖的降解问题等[4，5]。本试验中菘蓝根多糖得率高于叶多糖得率[12-15]，与其他研究结果一致。影响多糖得率的因素复杂，包括料液比、提取时间、提取温度、提取次数、醇沉浓度、醇沉时间等，本研究仅取前三个常见因素作正交优选。今后有必要就工艺纯化方面和提取工艺中的其他因素的影响效果做深入研究。

参考文献：

[1] 柳继风，张雪梅，薛多清，等.大青叶的化学成分研究[J].中国中药杂志，2006，31（23）：1961-1965.

[2] 赵晓娟，李  琳，刘  雄，等.大青叶的本草学研究、化学成分及药理作用研究概况[J].甘肃中医学院学报，2011，28（5）：61-64.

[3] 尹  艳，高文宏，于淑娟.多糖提取技术的研究进展[J].食品工业科技，2007，28（2）：248-250.

[4] 张智芳，林文庭，陈灿坤.植物多糖提取工艺的研究进展[J].海峡预防医学杂志，2008，14（3）：18-20.

[5] 王雪冰，赵天瑞， 樊  建.食用菌多糖提取技术研究概况[J].中国食用菌，2010，29（2）：3-6.

[6] 徐翠莲，杜林洳，樊素芳，等.多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法研究[J].河南科学，2009，27（12）：1524-1529.

[7] 方积年，丁  侃.天然药物-多糖的主要生物活性及分离纯化方法[J].中国天然药物，2007，5（5）：338-347.

[9] 李晓冰，赵宏艳，郭  栋.灵芝多糖药理学研究进展[J].中成药，2012，34（2）：332-335.

[10] 吴  梅，谭  睿.黄芪多糖研究进展[J].川北医学院学报，2013，28（1）：17-22.

[11] 齐香君.现代生物制药工艺学[M].北京：化学工业出版社，2009.

[12] 高续春.多糖提取纯化方法研究进展[J].榆林学院学报，2009，19（4）：65-67.

[13] 张体祥，刘  捷，张  萍，等.板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究[J].时珍国医国药，2009， 20（8）：1992-1994.

[14] 陈  奎，陈易彬. 板蓝根多糖提取工艺的研究[J].食品研究与开发，2007，28（4）：57-59.

[15] 张  萍，刘  捷，邓扬悟，等.板蓝根多糖的提取工艺及其清除自由基作用的初步研究[J].河南工业大学学报（自然科学版），2006，27（3）：36-38.endprint

1.4.2  多糖提取工艺  提取工艺流程为：原料→粉碎→脱脂→热水浸提→取上清液→二次提取→合并上清液→醇沉→有机溶剂醇洗涤→干燥→粗多糖成品。

准确称取备用叶或根样品10 g，置于索氏回流器中，经一定量的乙醚回流抽提脱脂2次，每次2 h。取药渣，置于带塞锥形瓶中，按照设定的料液比加去离子水，设定并保持温度恒定，在水浴锅中进行搅拌提取。将提取液冷却至室温，抽滤，将滤渣进行二次提取（与第一次提取条件相同），合并滤液，减压浓缩，加人95 %乙醇至含醇量80 %[11]，静置24 h后抽滤得沉淀，用无水乙醇和乙醚反复洗涤沉淀数次，60 ℃恒温干燥，得到粗多糖。

1.4.3  单因素试验  分别称取叶和根10 g，分别在提取温度为60、70、80、90、100 ℃，提取时间为1、2、3、4、5 h，料液比为1∶5、1∶10、1∶20、1∶30、1∶40（m/V，g∶mL，下同）条件下提取2次，每组重复3次，得出最佳提取条件。

1.4.4  正交试验  在单因素试验的基础上，选择料液比、提取温度和提取时间作3因素3水平的正交试验，每组3次重复，以菘蓝根多糖得率为考察指标，对多糖的提取工艺条件进行优化，因素与水平见表1。

1.4.5  多糖含量测定  取干燥至恒重的粗多糖样品100 mg，定容至100 mL再稀释10倍，吸取样品溶液2 mL于10 mL试管中，以制作标准曲线的方法操作。测定其吸光度并带入回归方程计算叶和根中多糖在原料中的得率。多糖得率计算公式如下：

多糖得率=■×100%

式中，Vs=100 mL;n为稀释倍数;C为样品溶液中多糖浓度（μg/mL）;W0为称取样品质量（g）;M粗=提取粗多糖质量（g）;M料为大青叶原料质量（g）。

2  结果与分析

2.1  标准曲线绘制

取吸光度对葡萄糖液浓度进行线性回归，得回归方程及标准曲线（图1）。

2.2  单因素试验结果

2.2.1  料液比对多糖得率的影响  由图2可知，随着料液比的降低，多糖得率呈上升趋势，当料液比达到1∶25左右，多糖得率较高，再继续增加溶剂量，多糖得率变化不大。如果去离子水用量过多，不利于以后的浓缩分离，而且增加醇沉中的醇用量，故选择1∶25为适合的料液条件，以根为原料的多糖得率稍高于叶。

2.2.2  提取温度对多糖得率的影响  提取温度从60 ℃升高到80 ℃时，多糖的得率迅速增加，超过80 ℃多糖的得率变化平缓，而温度达到95 ℃之后多糖的得率变化甚至有降低的趋势（图3）。其原因可能是温度过低，溶剂的渗透能力和溶解能力差，多糖不能有效溶出;温度过高虽对细胞的破坏作用增大，有利于多糖的浸出，但是会导致多糖裂解，使得多糖得率降低。故提取温度选择80～95 ℃时效果较好，以根为原料的提取结果稍高于叶。

2.2.3  提取时间对多糖得率的影响  随着提取时间的延长，多糖的得率逐渐增加（图4），提取3 h后多糖得率增加缓慢。考虑到时间过长会导致多糖结构破坏和降解，故提取时间选择2～3 h，以根为原料的提取结果稍高于叶。

2.3  正交试验

正交试验结果见表2，由表2可知，各因素对菘蓝根多糖得率影响大小依次为料液比、提取温度、提取时间。确定最佳提取工艺条件为A2B3C3，即在料液比1∶25时提取2次，每次3.5 h，提取温度95 ℃。在此最佳组合工艺条件下验证，多糖得率为3.93%。

3  小结与讨论

本试验以菘蓝叶和根为原料，通过单因素试验得出菘蓝根、叶中多糖的最佳提取条件为料液比1∶25，在80～95 ℃条件下提取2～3 h，根中多糖得率高于叶中，通过正交试验得在料液比1∶25，95 ℃下提取3.5 h时菘蓝根中多糖得率为3.93%。

多糖可溶于水，在多糖的水溶液中加入乙醇会破坏多糖与水形成的氢键，降低多糖溶解度，使多糖以沉淀形式析出。利用多糖的这一性质，可将多糖从水溶液中沉淀出来。相比酶提法、超声法和超临界萃取法等，传统的水提醇沉法有利于节约提取成本和某些负效应，如酶法降解副产物对提取会有影响，超声波的凝聚作用以及热点作用下多糖的降解问题等[4，5]。本试验中菘蓝根多糖得率高于叶多糖得率[12-15]，与其他研究结果一致。影响多糖得率的因素复杂，包括料液比、提取时间、提取温度、提取次数、醇沉浓度、醇沉时间等，本研究仅取前三个常见因素作正交优选。今后有必要就工艺纯化方面和提取工艺中的其他因素的影响效果做深入研究。

参考文献：

[1] 柳继风，张雪梅，薛多清，等.大青叶的化学成分研究[J].中国中药杂志，2006，31（23）：1961-1965.

[2] 赵晓娟，李  琳，刘  雄，等.大青叶的本草学研究、化学成分及药理作用研究概况[J].甘肃中医学院学报，2011，28（5）：61-64.

[3] 尹  艳，高文宏，于淑娟.多糖提取技术的研究进展[J].食品工业科技，2007，28（2）：248-250.

[4] 张智芳，林文庭，陈灿坤.植物多糖提取工艺的研究进展[J].海峡预防医学杂志，2008，14（3）：18-20.

[5] 王雪冰，赵天瑞， 樊  建.食用菌多糖提取技术研究概况[J].中国食用菌，2010，29（2）：3-6.

[6] 徐翠莲，杜林洳，樊素芳，等.多糖的提取、分离纯化及分析鉴定方法研究[J].河南科学，2009，27（12）：1524-1529.

[7] 方积年，丁  侃.天然药物-多糖的主要生物活性及分离纯化方法[J].中国天然药物，2007，5（5）：338-347.

[9] 李晓冰，赵宏艳，郭  栋.灵芝多糖药理学研究进展[J].中成药，2012，34（2）：332-335.

[10] 吴  梅，谭  睿.黄芪多糖研究进展[J].川北医学院学报，2013，28（1）：17-22.

[11] 齐香君.现代生物制药工艺学[M].北京：化学工业出版社，2009.

[12] 高续春.多糖提取纯化方法研究进展[J].榆林学院学报，2009，19（4）：65-67.

[13] 张体祥，刘  捷，张  萍，等.板蓝根多糖的提取和纯化工艺研究[J].时珍国医国药，2009， 20（8）：1992-1994.

[14] 陈  奎，陈易彬. 板蓝根多糖提取工艺的研究[J].食品研究与开发，2007，28（4）：57-59.

[15] 张  萍，刘  捷，邓扬悟，等.板蓝根多糖的提取工艺及其清除自由基作用的初步研究[J].河南工业大学学报（自然科学版），2006，27（3）：36-38.endprint