贾清华

摘要：进入现代社会，随着经济的发展，人们的生活品质越来越高，饮食方面的健康问题引起更多的关注，农药残留因其具有潜在的危险性成为广大消费者关注的焦点。基于此，本文对葡萄酒中农药的残留问题进行了深入的调查研究，供大家参考借鉴。

关键词：葡萄酒；农药残留；疏水值；分析检测

中图分类号：TS262文献标识码： A

前言

葡萄酒作为农业深加工产品，果实生长期间尤其是收获前喷洒的农药会不同程度地残留到酒液中，当残留量达到一定程度时，这些污染物不仅抑制葡萄酒的发酵过程，还会影响葡萄酒的感官质量，因此，欧盟于2009年规定了70多种农药在葡萄酒中的残留量。但我国除对酿酒原料的农药残留量进行限定外，在葡萄酒农药残留标准方面与发达国家相比还有不小的差距，多菌灵超标事件更是给国人以警醒，因此，监测和控制我国葡萄酒中的农药残留量，对其安全性进行评估，是促进葡萄酒市场长期稳定发展的关键。

1材料与方法

1．1材料、试剂及仪器

葡萄酒样品：市场购买。

酿酒原料：赤霞珠(CabernetSauvignon)品种，国内某企业提供。

主要化学试剂：40种农药标样：农业部环境保护科研监测所研制；环氧七氯(内标)：Sigma公司。

仪器设备：安捷伦气质联用仪，离心机，旋涡混合器，氮吹仪，超声波清洗器，分析天平(精确至0．0001g)，超纯水器，PestiCarb-NH2(石墨化碳黑和氨基柱)小柱。

1．2试验方法

1．2．1农药残留测定方法

1．2．1．1农残提取

准确称取10．00mL葡萄酒试样于50mL离心管中，依次加人10mL正己烷，3gNaCl。超声5min后再涡旋振荡5min，以5000r／min离心5min，移取上清液于浓缩瓶中，再加入10mL乙酸乙酯溶液重复提取1次．合并提取液，氮吹至近干，立即加入丙酮溶解，定容到lmL，待净化。1．2．1．2净化

在PestiCarb—NH2(石墨化碳黑和氨基柱)小柱上方加入2cm的无水硫酸钠，用3mL乙腈与丙酮的混合溶剂混合液(体积比2：1)预洗串联柱PestiCarb—NH2小柱，保持湿润，然后将上述lmL丙酮溶液移至串联柱中，然后用3mL的乙腈和丙酮的混合液(体积比2：1)洗涤浓缩液收集瓶，然后将洗涤液转移至柱中，再重复洗涤浓缩液收集瓶1次，静置2min，再用12mL乙腈与丙酮的混合溶剂混合液(体积比2：1)洗涤浓缩液收集瓶，用氮吹仪吹到小于lmL。然后用丙酮定容到1mL，并加入20μL的内标储备液，混匀，用于气相色谱质谱测定。

1．2．1．3GC—MS条件

DB一5ms(或DB一1701)石英弹性毛细管色谱柱(30x0．25x0．25)；色谱柱初始温度60℃，以10℃／min程序升温至120℃。以4℃／min升温至220℃。以8℃／min升温至300℃(保持10min)；进样15温度：280℃；接口温度：250℃；载气：氦气(99．999％)；流速：1．0mL／min；进样量：lμL。

1．2．2方法评价

1．2．2．1标准曲线的制定

配制1．000mg/L、0．500mg／L、0．250mg／L、0．125mg／L和0．050mg／L 5个浓度水平的40种农药混标，按照1．2．1方法提取、测定，各水平重复3次，以各农药峰面积与内标峰面积之比对其相应浓度进行线性回归计算，绘制农残标样标准曲线。

1．2．2．2检出限测定方法

使用浓度为0．05mg／L的农药混合标准溶液逐步稀释，配制成0．025mg／L、0．0125mg／L进行分析，以产生3倍噪声信号测定该方法的检出限。

1．2．2．3精密度和回收率的测定方法取葡萄酒样，按照1．2．1方法处理、分析，重复3次，确定葡萄酒的农残含量。分别吸取浓度为2mg／L的农药混合标准溶液4mL、2mL、lmL加人到6mL、8mL和9mL的葡萄酒中，按照1．2．1方法提取和净化，平行处理6次，得到样品处理液，进行GC—MS分析，计算其精密度和回收率。

1．2．3工艺流程红葡萄酒：葡萄原料一除梗破碎(添加30mg／LSO2) →酒精发酵(25℃) →分离→压榨→苹果酸→乳酸发酵→分离→下胶→稳定性处理→过滤→装瓶。

1．2．4实验设计

采用单因素试验方法，分别研究了农药类型和添加量对葡萄酒发酵过程的影响，并跟踪分析了所添加农药在整个生产过程中含量的变化情况。所有试验处理均设3次重复。

2结果与分析

2．1方法的验证

按照1．2．2中的方法对分析方法进行评价，结果见表l。

由表1可知，所分析的40种农药残留，其中27种的线性范围在0．0251mg／L之间，其余13种线性范围在0．05～1mg／L之间；在相应线性范围内40种农药残留的相关系数在0．9912～0．9998之间；检测限LOD(S／N=3)范围从氰戊菊酯1．14μg/L到甲胺磷18．86μg/L，均在20μg/L以下；日间精密度RSD％在O．962％～7．429％之间，该方法的回收率较好，平均加标回收率在79．7％～112．4％之间。

综合上述各个指标的分析结果，说明该方法精确、稳定，可以满足葡萄酒农药残留的定量分析要求。

2．2我国葡萄酒样品中农药残留含量分析研究

分析了28个葡萄酒样品(20个红葡萄酒，8个白葡萄酒)中的农药残留情况，结果见表2和图l。28个葡萄酒样品中，样品检测率大于5％的农药有13种．所检出的农药残留其含量在0．001～0．372mg／L之间。根据欧盟对葡萄酒中各种农残(MRLs)标准规定，检测样品中的农残含量均低于欧盟现有标准所规定的限值。

图1显示了28个葡萄酒样品中的农残含量，其中前8个为白葡萄酒，后20个是红葡萄酒，9号、10号为采用有机方式种植的红葡萄酒样品。从图l可以看出，红葡萄酒的农残含量明显高于白葡萄酒，本研究中白葡萄酒农残总量为0．280～0．408mg／L，平均含量为0．359rag／L；红葡萄酒(不含有机葡萄)农残总量在0．464～0．837mg／L之间．平均含量为0．622mg/L，这主要是由于两种葡萄酒酿酒工艺不同所致：采用的有机种植的葡萄酒由于在原料生长期间不允许使用化学农药，所以在样品中应该检测不出农残．但本研究2个样品中均检测出了低于10μg/L微量农残，这可能是由于土壤受污染所致。

3讨论

本研究建立了40种农药残留的GC—MS检测方法。方法的平均加标回收率在79．7％～112．4％之间：相关系数R2>0．99，线性关系良好：样品间精密度RSD在0．962％～7．429％之间，说明本方法简便、准确、灵敏、重现性好，可用于葡萄酒农药残留的检测。本研究选取了28个葡萄酒样品进行农残检测．检测率大于5％的农药有13种，其含量在0．001～0．372mg／L之间，但均未超过欧盟对葡萄酒中各种农药最大残留量的规定。白葡萄酒中的农药残留量较红葡萄酒少，白葡萄酒农残平均含量为0．359mg／L：红葡萄酒(不含有机葡萄)农残平均含量为0．622mg／L。

本研究选取了葡萄园中常用的5种农药进行模拟酿造试验，结果显示，在葡萄汁中添加不同种类农药，其残留量差异非常显著，其中甲霜灵残留率最高，而氰戊菊酯的残留率最低，另外3种农药的残留量与其添加量间无规律性。分析发现农药的残留率与其在水中的疏水性有关，当疏水值高于5时，在葡萄酒中基本无残留量；而当疏水值低于5时，疏水值越低，残留率越高。而且比较发酵后酒液、残渣和过滤操作对农药残留的影响后发现。

参考文献

[1]中华人民共和国卫生部，中华人民共和国农业部．GB2763—2012食品安全国家标准食品中农药的最大残留限量[S]．北京：中国标准出版社．2012

[2]淑英．葡萄酒中农药残留的色谱分析法研究进展[J]．中国农学通报，2005，21(8)：65—69

[3]任晓燕等．基质固相分散气相色谱一质谱联用检测葡萄酒中9种有机磷农药残留[J]．农产品加工，2010(4)：66—68