林 淼，周美玲， 霍永久，赵国琦

（扬州大学动物科学与技术学院，江苏扬州225009）

紫苏醛和柠檬烯是紫苏叶挥发油的主要成分。柠檬烯是单萜化合物，具有抗肿瘤、抑菌等多种生物功能（Aggarwal，2002）。紫苏醛是一种无色或浅黄色单萜化合物，具有抗癌等生物功能（Masutani等，2009）。目前有关紫苏叶挥发油及其成分对动物生长和肠道健康影响方面的研究鲜见报道。本试验旨在研究紫苏叶挥发油及其主要活性成分——紫苏醛、柠檬烯对小鼠生长和肠道相关菌数量的影响，为紫苏挥发油的开发与应用提供依据。

1 材料与方法

1.1 材料与试剂 紫苏叶挥发油采用周美玲等（2014）方法制备；紫苏醛标准品，由北京中科仪友化工技术研究院提供，柠檬烯标准品，由Sigma公司生产。

1.2 试验动物及饲养管理 选用60只（20±1）g、约4周龄的健康雄性小鼠，饲喂配合颗粒料，按实验动物方法饲养，预试3 d后进入正式期。

1.3 试验设计 60只小鼠按体重随机分为对照、挥发油、紫苏醛和柠檬烯4组，每组15只。每天9：00分别给对照组和3个试验组按照250 μL/只的剂量灌胃0.2%Tween-80、0.03 mL/kg挥发油、8.54 mg/kg紫苏醛和4.53 mg/kg柠檬烯，连续灌胃21 d。紫苏醛组和柠檬烯组的灌注剂量与挥发油组中实际含有的紫苏醛和柠檬烯含量一致，自由采食与饮水，每天观察小鼠的精神状态、进食量和粪便等变化。

1.4 样品采集与分析

1.4.1 生长性能指标 生产指标以重复为单位，分别计算每周小鼠平均日增重（ADG）、平均日采食量（ADFI）和耗料/增重（F/G）。

1.4.2 血清生化指标 每组随机选取10只小鼠，在末次给药24 h后摘眼球采血，于37℃水浴孵育1 h，4℃下3000 r/min离心10 min，血清分装后置于-20℃冰箱中保存。总蛋白、白蛋白、球蛋白、葡萄糖、甘油三酯、总胆固醇等血液生化指标采用全自动生化分析仪测定。

1.4.3 粪便中大肠杆菌、乳酸菌含量 试验第7、14、21天收集粪便。采集器械火焰灭菌，无菌取粪样，每只小鼠采集粪样1颗，按组装入灭菌三角瓶中封口称重，加9倍重量的无菌水稀释粪样，在漩涡混合仪上振荡混匀制成悬液，用无菌水10倍稀释法梯度稀释悬液至10-8。选用麦康凯琼脂培养基和 10-5、10-6、10-7三个稀释度，涂布接种，每个浓度三个重复，37℃恒温培养箱中有氧培养24 h，记录菌落数量。选用MRS培养基和10-5、10-6、10-7三个稀释度，涂布接种，每个浓度三个重复，37℃恒温培养箱中厌氧培养48 h，记录菌落数量。

1.5 统计分析 试验数据采用Excel软件整理，结果以 “平均值±标准差”表示，采用软件SPSS 17.0的One-way ANOVA进行方差分析，并用Duncan’s法进行差异显著性比较。

2 结果

2.1 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠生长性能的影响 由表1可知，与对照组相比，灌胃第1周，挥发油组与紫苏醛组小鼠的ADG分别提高了46.2%和39.6%（P＜0.05）；柠檬烯组ADFI和F/G分别降低了38.6%和51.5%（P＜0.05）。灌胃第2周，挥发油组小鼠ADG和ADFI以及紫苏醛组 F/G分别提高了 49.2%、44.3%和 32.5%（P＜0.01）。灌胃第3周，挥发油组和紫苏醛组ADG分别降低了57.1%和42.9%（P＜0.05）；各组小鼠ADFI差异不显著（P＞0.05）；挥发油组、紫苏醛组和柠檬烯组的F/G分别提高152.7%（P＜0.01）、56.2%（P＜ 0.05）和 43.3%（P ＜0.05）。由此可见灌胃前2周挥发油、紫苏醛和柠檬烯均能提高小鼠的生长速度，挥发油的效果最佳，紫苏醛次之。挥发油组各试验期平均ADFI显著高于对照组（23.4%），平均F/G各组间无显著差异。

2.2 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠血液生化指标的影响 由表2可知，挥发油组尿素氮含量较对照组降低了27.1%（P＜0.05），白蛋白含量较紫苏醛组提高3.5%（P＜0.05）。紫苏醛组的葡萄糖含量较对照组显著提高了51.4%（P＜0.05）。柠檬烯组白球比较挥发油组与紫苏醛组分别提高11.6%和12.6%（P＜0.05）。各试验组其他指标与对照组无显著差异（P＞0.05）。

2.3 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠粪便中大肠杆菌和乳酸菌数量的影响 由表3可知，与对照组相比，灌胃3周，挥发油组小鼠粪便大肠杆菌数每周分别降低了4.83%、8.35%和12.7%（P＜0.05）；灌胃1周三个试验组之间大肠杆菌数差异不显著（P＞0.05），灌胃2周和3周挥发油组显著低于紫苏醛组和柠檬烯组（P＜0.05）。整个试验期三个试验组乳酸菌数与对照组均无显著差异（P ＞ 0.05）。

表1 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠生长性能的影响

表2 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠血液生化指标的影响

表3 紫苏叶挥发油、紫苏醛和柠檬烯对小鼠粪便内大肠杆菌和乳酸菌数量的影响 ×106cfu/g

3 讨论

3.1 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠生长性能的影响 本试验由于灌胃第3周时小鼠已处于成年期，因此各组指标与对照组的差异与灌胃前2周的结果差异较大。此外，紫苏挥发油对小鼠促生长效果最佳，紫苏醛次之，初步说明挥发油的主要活性成分中，紫苏醛的作用优于柠檬烯。潘存霞和谢君（2011）报道，紫苏籽提取物能有效促进肉鸡生长，提高鸡肉品质。张文火等（2011）报道紫苏籽提取物对肉牛生长无负面影响，同时可改善牛肉嫩度和胴体品质。岳崟等（2014）研究紫苏叶促进大鼠肠蠕动的作用结果表明，紫苏叶石油醚提取物及乙醇提取物具有促进胃肠消化吸收的作用。

挥发油、紫苏醛、柠檬烯之所以能提高小鼠生长速度，推测一方面是挥发油中的紫苏醛、柠檬烯具有特殊的芳香气味，刺激了机体消化道黏膜上的感受器，提高了小鼠的采食量；另一方面是挥发油的主要成分中含有紫苏醛、柠檬烯等广谱杀菌成分，它可以减少胃肠道的有害微生物，提高肠道有益微生物数量，从而提高小鼠对饲料的利用率，降低料重比，促进小鼠生长。由此说明挥发油促进小鼠生长的作用与紫苏醛和柠檬烯有关。

3.2 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠血液生化指标的影响 尿素氮水平升高，表明机体蛋白分解作用的增强，本试验中三个试验组小鼠血清尿素氮含量下降，表明机体营养物质的吸收增强，氮沉积增加。脂类物质代谢和葡萄糖代谢相互影响，血糖含量降低时会通过糖原异生加速体内脂肪分解代谢。如果体内脂肪分解过快则会引起脂肪代谢紊乱，导致胆固醇含量增高。紫苏叶油以0.35 mL/kg剂量给予家兔口服，可使血糖上升；紫苏叶油中的主要成分紫苏醛的升血糖作用强于紫苏油（中国医学科学院药用植物资源开发研究所，1988）。三个试验组小鼠血清中葡萄糖水平均升高，表明增强了小鼠糖代谢水平，其中紫苏醛组含量最高，这与前人研究结果相符。挥发油组血清中甘油三酯与胆固醇含量极显著降低，紫苏醛组和柠檬烯组有降低趋势，但无显著差异。由此初步判断紫苏醛和柠檬烯不是降低甘油三酯和胆固醇的主要物质。有研究表明，紫苏油中含有少量的亚麻酸，α-亚麻酸具有降低血脂、保护心血管的作用（Kris-Etherton，2002）。这可能与紫苏能降低甘油三酯和胆固醇的作用有关。

3.3 紫苏叶挥发油、紫苏醛、柠檬烯对小鼠粪便内大肠杆菌和乳酸杆菌数量的影响 植物挥发油作为植物的次级代谢产物具有非特异性抗菌功能，不但能直接抑菌杀菌而且还不产生抗药性，因此被认为是一种“安全、可控、高效、稳定”的饲料添加剂。林硕等（2009）研究发现，紫苏挥发油有效抑制大肠杆菌和枯草芽孢杆菌生长。魏雯等（2014）研究表明，紫苏叶和紫苏籽皮水浸液对大肠杆菌有抑制作用。本试验3个阶段，灌胃紫苏挥发油不同成分小鼠大肠杆菌数均有下降趋势，且挥发油下降最快，柠檬烯组下降最慢，表明挥发油中紫苏醛的抗菌作用强于柠檬烯。各处理组的小鼠肠道内乳酸菌数有增高趋势，但差异不显著。由此可见，紫苏挥发油及紫苏醛、柠檬烯能减少有害菌含量，促进肠道中有益菌的生长，增强肠道免疫功能，起到益生元的潜在效果。

4 结论

本试验结果表明，紫苏叶挥发油可显著提高小鼠生长性能，并抑制大肠杆菌数量，紫苏醛组的效果次之，但紫苏醛和柠檬烯对大肠杆菌数量未产生显著影响，同时乳酸菌数量在各处理组间均无显著差异。

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