王淑萍，田 甜

（长春工程学院理学院，长春130012）

黄芪（Radix Astragalus）是豆科植物中常用的中草药，黄芪多糖（Astragalus Polysacharin，APS）是黄芪中最重要的天然有效成分，是黄芪药理作用中起决定性因素的一类大分子化合物，具有促进免疫器官功能和抗体生成，抗菌抗病毒和抗肿瘤，防衰老及抗辐射，双向调节血糖等作用［1－4］。黄芪多糖的多种生物活性及良好的临床效果已成为多年来国内外中药提取及中草药现代化研究的焦点之一［5－6］。自1981年黄芪多糖被提取分离以来，研究报道不断增多［5－6］，作用范围日益扩大，对黄芪多糖的研究引起了人们的极大关注。但是传统黄芪多糖的提取工艺得到多糖粗品的收率极低，加上提取成本很高，使得黄芪多糖的开发利用受到限制。为了进一步开发利用该类活性成分，许多学者在研究黄芪多糖组成、结构和产物活性的同时，对其提取分离工艺进行了研究，以期找出一种更合理、更可行的生产工艺［1］。本文采用温浸法对不同粉碎粒度对黄芪多糖提取率的影响进行了研究，为黄芪多糖的大规模开发和应用提供了科学资料和依据。

1 实验部分

1.1 实验主要仪器、试剂及材料

电子天平（上海天平仪器厂，FA1004）；紫外可见分光光度计（上海精密科学仪器有限公司，UV755B）；电热恒温鼓风干燥箱（上海跃进医疗器械厂，101－1－BS）；恒温水浴锅（河北冀骅市航天仪器厂，DZKW－D）；循环水式多用真空泵（上海豫康科教仪器设备有限公司，SHB－ⅢA）；酒精计（河北省河间市黎民居仪表厂）；葡萄糖标准品（上海金穗生物科技有限公司，色谱纯，批号：20131217）；黄芪饮片（购之于长春市人民大药房，经鉴定为蒙黄芪，产地甘肃）；实验所用试剂均为北京化工厂生产（分析纯）。

1.2 实验方法

1.2.1 标准曲线的绘制［7］

准确称取葡萄糖标准品10mg于100mL容量瓶中，加去离子水稀释至刻度，摇匀，质量浓度为0.1mg／mL。分别吸取配制好的葡萄糖标准溶液0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL于10mL容量瓶中，分别加去离子水至2mL，加入5%的苯酚溶液1mL，摇匀后迅速加入5mL浓硫酸显色，振摇5min，在沸水浴上加热15min后于冷水浴中冷却30min。在490nm处以试剂为空白测定吸光度A。

1.2.2 黄芪多糖的提取

取黄芪饮片粉碎，分别过80目、45目、30目筛，分别称取40g粉末置于250mL容量瓶中，按1∶10的料液比加去离子水，放入沸水浴中提取1.5h，提取液抽滤，滤渣按照1∶8料液比加水，再次提取1h，抽滤，合并2次滤液，滤液浓缩至1∶1（g／mL）

1.2.3 黄芪多糖的分离

将浓缩至1∶1的提取液分别按照1∶3加入95%的乙醇溶液，边加边搅拌，室温静置过夜，弃去上清液。沉淀用50mL无水乙醇洗涤一次，沉淀放置2h，挥发乙醇后，称膏重。沉淀物放入真空干燥箱干燥12h，称重。

1.2.4 95%乙醇沉淀物糖含量测定

分别取80目、45目、30目95%乙醇沉淀干燥物15mg，加水定容至100mL，取1mL于10mL容量瓶中，按照配制标准曲线的方法处理样品，测定吸光度。

2 结果与讨论

2.1 葡萄糖标准曲线结果分析

以葡萄糖含量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线，用最小二乘法进行线性回归，得葡萄糖标准曲线的线性回归方程为Y＝0.702 7 X＋0.013 1，相关系数r＝0.998 7，葡萄糖含量在（0.0～1.0）×10－4g范围内服从朗伯—比耳定律。

2.2 黄芪多糖分离结果与讨论

不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物得率见表1。

表1 不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物重量及得率

可见，粉碎粒度为80目时95%乙醇沉淀物得率最高为18.49%，粉碎粒度为30目时95%乙醇沉淀物得率最低为11.90%。

2.3 95%乙醇沉淀物糖含量测定结果与分析

不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物吸光度测得值，见表2。

根据葡萄糖溶液标准曲线Y＝0.702 7 X＋0.013 1计算得到不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物糖含量和纯度，见表3。

可见黄芪多糖提取率受黄芪不同粉碎粒度的影响较大，粉碎粒度越小，黄芪多糖提取率越高，当粉碎成细粉80目时可以大大提高黄芪多糖提取率。

表2 不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物吸光度值

表3 不同粉碎粒度95%乙醇沉淀物黄芪多糖含量及纯度

本论文通过温浸法对黄芪不同粉碎粒度对黄芪多糖提取率的影响进行了研究，实验结果显示黄芪粉碎粒度可能是影响黄芪多糖提取率的关键因素，当黄芪粉碎成细粉80目时可以大大提高黄芪粗多糖的纯度和提取率，这些数据为我国传统中药黄芪的大规模开发和应用提供了科学资料和依据。

［1］刘瑞生.黄芪多糖提取方法研究进展［J］.中国兽药杂志，2007，41（3）：35－36.

［2］卢彦琦，贺学礼.黄芪化学成分及药理作用综述［J］.保定师范专科学校学报，2004，17（4）：40－42.

［3］姜俊艳，陈旭东，李长坤.黄芪多糖的用途和提取［J］.化学工程师，2003，97（4）：55－56.

［4］韩凤兰，陆峰，陈宇红.黄芪多糖的提取研究［J］.宁夏农林科技，2004，5：22－23.

［5］LI Ru－Jiang，QIU Shu－Dong，QIU Hong－Xia，et al.The immunotherapeutic effects of Astragalus polysaccharide in type 1diabetic mice［J］.Biological ＆Pharmaceutical Bulletin，2007，30（30）：470－476.

［6］Masashi Tomoda，Noriko Shimiza，Naoko Ohara，et al.A ReticuLoendotheLiaLsystem－activating gLycan from the roots of AstragaLus Membranaceus［J］.Phytoche mistry，1992，31（1）：63.

［7］李孝栋，陈景山，陈峰，等.黄芪多糖含量测定的方法学研究［J］.世界科学技术：中医药现代化，2006，8（2）：36－37.